细胞培养的个人体会.pptVIP

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2021-08-09 发布于广东
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细胞培养的个人体会.ppt

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;如何做好实验？ “播下一种习惯，你将收获一种性格；播下一种性格，你将收获一种命运”。威廉.詹姆士个人体会：; ;内容提要;;;CO2培养箱;超净工作台 ;;;;血清;完全培养基;器皿加洗洁精浸泡数小时后，用自来水冲洗9次，然后蒸馏水冲洗3次。烘干：洗干净后烘干。包装：用牛皮纸或布包装。消毒前贴上灭菌条，条上写明日期、物品、所有者。 ; 高压灭菌：包装好的器皿装入高压锅内，121 ℃，维持30分钟。灭菌后烘干：高压消毒后器皿会被蒸气打湿，要放入烤箱内烘干备用。 ;细胞的复苏和冻存;;;个人方法;;细胞的换液和传代;;贴壁生长细胞的换液;;;细节决定成败，要注意的细节很多。详细的内容可参考“细胞培养无菌技术”PPT、视频。 ;常见细胞污染;;细胞密度 = (1+2+3+4) / 4 万个细胞每毫升;合适细胞密度是实验成功关键;合适的细胞培养液体积;常用细胞接种密度计算;个人体会：所需细胞悬液为：配制的总体积除以稀释倍数即可细胞悬液稀释倍数:110万/ml除以2万/100ul=5.5倍所以需要取 10.6ml 除以5.5倍=1.93ml的细胞悬液。补加10.6-1.93=8.67培养基。混匀后，每孔加入100ul. 原理自己慢慢想！ ;个人体会：所需NGF储存液为：配制的总体积除以稀释倍数即可所以需要取 4.5ml 除以200倍=0.0225ml的NGF储存液。补加4.5-0.0225=4.478培养基。混匀后，每孔加入500ul.