梅毒的实验室诊断.pptxVIP

梅毒的实验室诊断会计学梅毒的实验室诊断 梅毒（Syphilis）是由苍白螺旋体（Treponema Pallidum TP）感染引起的一种慢性性传播疾病，本病表现复杂、病期长，几乎可侵犯全身各个器官，发展过程时隐时现，症状和体征呈多样化，自然感染过程（不治疗）可产生不同临床症状的一期、二期、三期梅毒。病原体梅毒螺旋体特点1.小而细螺旋状，长6~14um,直径0.25~0.3um.有8~14规则、紧密螺旋。2.透明不容易着色.3.微需氧（1~3％）,人工培养不生长。4.繁殖方式为裂殖.5. 对热敏感，骤冷超低温保存数年，复活后接种动物其毒性、活力、形态不变。致病机理梅毒螺旋体→破损皮肤及粘膜感染→ 2～4周潜伏→感染局部螺旋体大量繁殖→硬下疳→ 经3～8周→ 症状自行消失→ TP附近淋巴结→ 血液播散→ 全身组织和器官→ 二期梅毒→ 三期梅毒→ 心血管、神经等损害。传播途径 性传播：性接触是主要的传染途径未经治疗的患者在感染后的1年内最具有传染性。随着病期的延长，传染性越来越小。到感染后4年，通过性接触一般无传染性。传播途径 垂直传播：胎传在妊娠任何阶段，梅毒螺旋体均可通过胎盘传染。病期越长，传染性越小。早期梅毒的母亲，发生流产、死产、胎儿先天梅毒或新生儿死亡率高于晚期梅毒的母亲。传播途径间接传播：污染物、输血。各期梅毒标本采集及检查方法 临床症状 取材部位 检查方法一期梅毒 硬下疳、淋巴结 暗视野检查 血液 血清学检查二期梅毒 皮损、淋巴结 暗视野检查 血液 血清学检查隐性梅毒 血液 血清学检查三期梅毒 血液 血清学检查神经梅毒 血液、脑脊液 血清学检查梅毒实验室诊断方法暗视野检查法病原体检查镀银染色法直接免疫荧光法梅毒初筛试验：VDRL、USRRPR、TRUST血清学检查确证试验: FTA-ABS、TPHA、TPPA、TP-ELISA、 TP-RT 19S-IgM梅毒实验室诊断方法病原体（梅毒螺旋体）检查： 一、暗视野检查 二、直接荧光抗体检查 三、涂片染色检查法：镀银染色、吉姆萨染色、墨汁负染色。病原体检查法 一、暗视野检查法 原理?一期梅毒硬下疳、肿大淋巴结的淋巴液。?二期梅毒皮肤粘膜损害、扁平疣、梅毒疹。?梅毒孕妇羊水(7周) 以上标本均有梅毒螺旋体存在，此时用暗视野显微镜检查能找到梅毒螺旋体。病原体检查法 检查方法1、皮损取材：在载玻片加一滴生理盐水，用棉拭子蘸取无菌生理盐水抹去皮损（硬下疳、溃疡、梅毒疹、扁平疣）表面污物，挤压皮损周围，用钝刀刮取组织液混入载玻片盐水中，加盖玻片后暗视野镜检。2、肿大淋巴结取材：酒精消毒淋巴结表面，用1ml无菌注射器配12号针头，吸取无菌生理盐水0.25-0.5ml,无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，如此反复2-3次，取少量淋巴液于载玻片上，加盖玻片后暗视野镜检。病原体检查法3、羊膜穿刺：梅毒孕妇的羊膜穿刺由专职人员操作，将取得的羊水直接滴于载玻片上加盖玻片暗视野镜检。病原体检查法 [结果] 暗视野镜检可观察到特征性的梅毒螺旋体。◆螺旋整齐，数目固定（8~14）。◆白色透明折光性强。◆特征性运动方式：旋转运动、伸缩移行、弯曲前行。暗视野显微镜法直接镜检图像（×1000）病原体检查法 [临床意义] １、暗视野检查可作为梅毒诊断的确证试验，若发现有梅毒螺旋体，即可确诊为梅毒感染。 ２、此法特别适用于血清学试验阴性的早期梅毒诊断，尤其对早期有硬下疳，但梅毒血清反应尚未呈阳性者意义更大。 3、暗视野检查是目前快速诊断先天性梅毒可靠的检查方法。病原体检查法[注意事项] 1、取材前，要清洁皮损表面的污物。 2、应多取组织液提高阳性率，但要尽量避免出血。 3、取材后立即观察，以免影响活力 4、注意梅毒螺旋体的特征及运动方式，以鉴别其它螺旋体。 5、口腔中存在其他螺旋体，不推荐用于口腔皮损检查。病原体检查法 6、阴性结果不能排除梅毒，应稍后复查或做 血清学检查。 原因可能是： ⑴ 螺旋体数量不足 ⑵已用过抗生素或某些外用药 ⑶损害接近自然消退病原体检查法二.直接免疫荧光试验（DFA） TP-Ag （标本） ＋TPMcAb-FITC37 ℃x30分TPAg-Ab-FITC 洗涤封片荧光镜检莱果绿色梅毒螺旋体直接免疫荧光法镜检图像（×1000）病原体检查法方法学评价：DFA法特异性及敏感性均大于暗视野显微镜 检测。可区分梅毒螺旋体与非致病性螺旋体，可适 用于口、肛周等部位的损害。可因取材、荧光素、抗体质量及操作技术等 因素而致假阴性。病原体检查法三.镀银染色法标本涂片（TP）自然干燥固定、媒染 洗涤银氨液染色封片镜检可见棕褐色