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DNA指纹技术及其应用 DNA指纹技术及其应用 PAGE / NUMPAGES DNA指纹技术及其应用 DNA 指纹技术及其应用 一、什么是 DNA 指纹 人体包括有 100 万亿个细胞， 它们构成各样器官和组织。 染色体是遗传物质， 存在于细胞核 内。每一个人体细胞内含有 23 对染色体，它们大小各异。遗传信息储存于染色体内的 DNA 分子中，也就是说，基因的化学实质是有遗传效应的 DNA 片段。每个 DNA 分子含有好多 个基因， 基因的复制就是经过 DNA 的复制来达成的。 DNA 往常以双螺旋型的双链存在， 它的基本构成单元是四个碱基，即腺嘌呤 (A) 、鸟嘌呤 (G) 、胞嘧啶 (C) 和胸腺嘧啶 (T) 。 DNA 双链经过氢键按 A— T、G— C 的互补配对方式绞结在一同。 上述四种碱基在 DNA 长链中的 不同摆列组合， 构成了一系列密码， 在受精卵到个体形成的整个过程中起到调控作用， 进而 使得人类个体之间的特色变化多端，相互差别。 人类基因组 DNA 中储存着可供正常生计和遗传的信息，这些信息以基因、密码的形成 摆列组合在 DNA 分子之中，此中能够制造蛋白质的基因约有 8 万个。 DNA 由以碱基、核 糖和磷酸构成的核苷酸长链构成，核苷酸摆列方式叫序列，即一级构造。 DNA 序列中存在 三种种类： 单拷贝序列、 中等程度重复序列和高度重复序列。 重复序列就是一种序列在 DNA 分子中重复出现几百次、几千次、几万次甚至百万次，它们约占 DNA 总序列的 3～4％。每 个重复序列在 300 个核苷酸长度以内， 因为高度重复序列经超离心后， 以卫星带出此刻主要 DNA 带的周边处， 所以也被称为 “卫星 DNA” 。卫星 DNA 中的重复序列单元则称为 “小卫星 DNA” 。 “小卫星 DNA” 拥有高度的可变性，不同个体相互不同。但 “小卫星 DNA” 中有一小段序 列则在全部个体中都同样，称为 “中心序列 ”。假如把中心序列串连起来作为分子探针，与不 同个体的 DNA 进行分子杂交，就会体现出各自独有的杂交图谱，它们与人的指纹同样，具 有专一性和特色性，因人而异，所以被称作 “DNA 指纹 ”(DNA fingerprint)。 二、 DNA 指纹的特色 归纳起来说， DNA 指纹拥有以下三大特色： 1、多位点性 高分辨率的 DNA 指纹图往常由 15～ 30 条带构成，看上去就像挂号信上 的条码签同样。 DNA 指纹区中的绝大部分区带是独立遗传的。所以，一个 DNA 指纹探针 能同时检测基因组中数十个位点的变异性。 2、简单的遗传方式 DNA 指纹图中的区带是能够遗传的，这不同于人的指纹。 DNA 指 纹区带按照简单的孟德尔遗传方式。 后辈图中的每一条带都能够在双亲之一的图中找到， 只 有 0.004 的可能性，使儿女中的一条带不可以在其父亲母亲中的图中找到 (基因自觉突变的结果 )。 同一个体无病变的不同组织产生的 DNA 指纹图完整同样， 并能在培育的细胞株中保持下去。 需要说明的是，同卵双胞胎的 DNA 指纹图完整同样。 3、高度变异性 不同的个体或集体有不同的 DNA 指纹图。一般采纳任何一种辨别四个 碱基的内切酶， 这类变异性就能表现出来。 英国遗传学家杰弗里斯对白种人研究表示， 两个 随机个体拥有完整同样的 DNA 指纹图的概率， 为三千亿分之一 (即 3×10-11)。两个同胞个体 拥有同样图谱的概率也只是为二百万分之一 (即 2×10-6) 。 三、 DNA 指纹术的工作原理 一般要经过以下几点来达成： 1、将送检的各样生物学检样，如毛发、血痕、精斑、人体组织或白骨等，把此中所含 的 DNA 提拿出来。 2、采纳与探针配对的限制性核酸内切酶，在长链 DNA 地点上加以切割，使分子量很 大的 DNA 长链切短成很多长度不同的小片段。 3、在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中，对酶解完整后的 DNA 片段进行电泳，各酶切片 段就会按其长度大小在电场中进行分别。 4、先用碱性溶液使凝胶板中分别开的双链 DNA 片段变性为单链片段，而后将凝胶板 夹在尼龙膜中，使这些单链 DNA 片段印溃 (blot-ting) ，转移并永远性地固定在尼龙膜上。 5、让放射性 DNA 探针与尼龙膜上的单链 DNA 片段进行分子杂交。 6、用放射性胶片与尼龙薄膜叠放， 尼龙膜上的放射性探针便会发出 X 射线使胶片曝光， 进而使杂交有探针的长度不同的 DNA 片段地点显影在胶片上。这样的特色 DNA 片段条状 图谱，即是所谓的 DNA 指纹。 四、 DNA 指纹术的应用 因为 DNA 指纹供给了丰富的个体特异性遗传标记，因此在法医学判定中拥有重要意 义