细胞生物学：实验二 细胞化学成分的显示.pptVIP

2. 将涂片晾干标记后放在70％乙醇中固定5分钟，室温晾干。 3．放入5％三氯醋酸中60℃ 20分钟，抽提出核酸。 4．清水浸洗（3分钟以上），以冲去痕迹的三氯醋酸。 5．滤纸吸干玻片上水分。 6. 一张片放入0.1％碱性固绿 (pH8.0～8.5) 中染色30分钟, 另一张片放入0.1％酸性固绿 (pH2.0～2.5)染色1-2分钟。 7．清水浸洗，烘箱烘干, 镜检。 五 实验报告 1、说明细胞内酸性蛋白和碱性蛋白染色 原理。 2、根据实验情况说明酸性蛋白与碱性蛋白在细 胞中的分布 3、画酸性蛋白与碱性蛋白在细胞中的分布图 细胞器永久制片的观察: （1）高尔基复合体 猫脊神经节切片 （2）中心体 马蛔虫子宫受精卵细胞切片 * * 实验二 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示 ㈠ 掌握血涂片制作方法。 ㈡ 掌握酸性蛋白、碱性蛋白显示的原理。 ㈢ 熟悉上述化学成分在细胞中的分布。 ㈣ 了解上述化学成分显示的方法。 一、目的要求 二、 实验原理 细胞内不同蛋白质分子中所带的碱性基团和酸性基团的数量不同，在不同PH溶液中，整个蛋白质所带静电荷多少也不同。在一定生理条件下，如整个蛋白质所带的负电荷多，就为酸性蛋白；带正电荷多，就为碱性蛋白。据此，可将细胞经三氯醋酸处理抽提掉核酸后，用不同PH的固绿染液分别染色，使细胞内的酸性和碱性蛋白质分别显示出来