细胞培养及病毒培养实验步骤.docxVIP

细胞培育及病毒培育实验步骤 细胞培育及病毒培育实验步骤 PAGE / NUMPAGES 细胞培育及病毒培育实验步骤 标准文档 实验二 传代细胞培育与病毒在传代细胞中的培育 一、实验目的 认识倒置显微镜的结构与使用， 认识不一样传代细胞的形态及接毒后的病变特点，掌握细胞的传代培育 方法、病毒接种 方法及收毒方法。 二、常用细胞的种类 BHK-21：仓鼠肾传代细胞 PK-15：猪肾传代细胞 IBRS-2：猪肾传代细胞 Hela ：人的子宫瘤细胞 Vero：非洲绿猴肾细胞 Marc-145 ：根源于 Vero 细胞 TK-143：人的胸苷激酶阴性细胞 Sf9 ：昆虫细胞 三、资料 1、100ml 细胞瓶、吸管、吸球、 96 孔细胞培育板、加样器、枪头 2、BHK-21（ baby hamster kidney ）细胞 3、0.25%胰酶 4、生长液：含 10%犊牛血清、 200U/ml 青、链霉素的 DMEM 保持液：含 2-5%犊牛血清、 200U/ml 青、链霉素的 DMEM 适用文案 标准文档 5、伪狂犬病病毒液（ PRV） 四、传代细胞培育的条件要求 1）细胞密度： 2-3 ×105 个/ml 2）pH范围 最适 ，耐受 3）培育温度 哺乳动物细胞一般为 37℃ 昆虫细胞 28-30 ℃ 五、常用细胞分别剂与作用原理 1、胰酶 使精氨酸或赖氨酸的羧基和其余氨基酸的氨