第三章 紫外可见分光光度法-食品安全.pptVIP

教学要求 1.掌握紫外—可见吸收光谱的产生原理及其与分子结构的关系。 2.掌握光的吸收定律及其偏离的影响因素。 3. 掌握紫外可见分光光度计的主要部件和类型。 4.定量方法 5.熟悉紫外可见分光光度计的分析条件的选择原则和方法 6.了解应用实例 紫外可见分光光度法是光谱分析法中的一种重要而应用广泛的分析方法。 1.紫外-可见分光光度法：是物质分子对紫外或可见光区电磁辐射 的吸收特征和吸收强度而建立的分析方法。 可见光区 400~760nm；紫外光区200~400nm。 一、概述 2.紫外—可见分光光度法的特点 （1）灵敏度较高：灵敏度可达10-5~10-6mol/L （2）选择性较好：多组分共存溶液中，无需化学分 离即可测定 （3）准确度高：仪器设备较好，相对误差可减小到 1%~2% （4）用途广泛：既可定性分析，又可定量分析 物质分子内部三种运动形式： 电子相对于原子核的运动 原子在其平衡位置附近的相对振动 分子本身绕其重心的转动。 二、紫外—可见吸收光谱 （一）分子吸收光谱的产生 ?每个振动状态下，有不同的转动状态，每个转动状态对 应着一个转动能级。 ?每个电子运动状态对应着一个电子能级，间隔约为 1-20eV。 ?每一电子运动状态下，有不同振动状态，每个振动 状态对应着一个振动能级 若用△E电子、 △ E振动、 △ E转动分别表示电子能级、振动能级转动能级差， △ E电子? △ E振动? △ E转动。 当用频率为?的电磁波照射分子，而该分子的较高能级与较低能级之差△ E恰好等于该电磁波的能量 h?时，即有 △ E = h? （ h为普朗克常数） 什么是分子吸收光谱？ 分子吸收外界的辐射能量，会发生运动状态的变化， 亦即发生能级的跃迁。 分子吸收光谱的产生 用不同波长的光一次照射物质分子，测量物质对不同波长单色光的吸收程度（吸光度），以波长为横坐标，以吸光度 A为纵坐标，就可以得到该物质在测量波长范围内的吸收曲线——分子吸收光谱图。 分子发生电子能级跃迁时具有什么特点？ 纯 电子能态 间跃迁 h? E2 E0 E1 E3 h? h? h? h? 分子内电子跃迁 带状光谱 锐线光谱 ? A ? A ? 在分子发生电子能级跃迁的同时，伴随分子振动和转动能级的跃迁，使得分子光谱是带状光谱。 2.紫外-可见吸收光谱的产生 3、紫外-可见吸收光谱特征 定性分析与定量分析的基础 定性分析基础 定量分析基础 物质对光的选择吸收（?，λmax，形状不同） A B A ? 在一定的实验条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。 A ? C 增大 产生光谱条件：?E = E2 - E1 = h ? （二）紫外—可见吸收光谱与分子结构的关系 分子结构的不同使其对不同波长光的吸收程度不同 E2 ﹑E1不一样，吸收的波长不一样 选择性吸收 单色光、复合光、光的互补 单色光 复合光 光的互补 单一波长的光 由不同波长的光组合而成的光如白光 若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光，那么就称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。 蓝 黄 紫红 绿 紫 黄绿 绿蓝 橙 红 青 也就是说，溶液呈现的是它吸收光的互补色光的颜色。 当白光通过某种溶液时，如果它选择性地吸收 了白光中某种色光，则溶液呈现透射光的颜色 光的互补：蓝?? 黄 二. 紫外－可见吸收光谱与分子结构的关系 1.预 备 知 识 有机化合物的紫外—可见吸收光谱是三种电子跃迁的结果： σ电子、π电子、n电子。 C O H n p s H 分子轨道理论的基本内容 分子轨道理论：一个成键轨道必定有一个相应的反键轨 道。通常外层电子均处于分子轨道的基态，即成键轨道 或非键轨道上。 价电子： 有机化合物的紫外—可见吸收光谱是由于构成分子的原子 的外层价电子跃迁所产生的，这些外层电子，有的是形