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2021年生物实验报告ABO血型鉴定 2021年生物实验报告ABO血型鉴定 PAGE / NUMPAGES 2021年生物实验报告ABO血型鉴定 生物试验汇报 姓名: 班级: 日期: 同组者: 试验序号: 试验题目: ABO血型判定 试验目: 1.掌握血涂片制作, 了解多种血细胞结构特点 2.掌握ABO血型判定方法 试验原理: 人类ABO血型遗传是由基因决定。很多時间, 一个基因只包含两个等位基因。不过, 控制血型基因I则有三个不相同位基因。即同一时间内, 一个位点能够有其中任何两个等位基因出现。 等位基因A使红血球产生抗原A; 等位基因B使红血球产生抗原B; 等位基因O使红血球不产生抗原; 等位基因A和B为等显性, O对A和B均为隐性。 ＡＢＯ血型判定原理是依据红细胞上有或无Ａ抗原和Ｂ抗原或AB抗原, 将血型分为Ａ型、 Ｂ型、 ＡＢ型及Ｏ型四种。本试验采取红细胞凝集试验, 用已知抗Ａ和抗Ｂ单克隆抗体来测定红细胞上有没有对应Ａ抗原或Ｂ抗原或AB抗原来确定ABO血型。 抗原抗体反应——在ABO血型系统中, 红细胞膜上抗原分A和B两种抗原, 而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A单克隆抗体或B抗原加抗B单克隆抗体, 则产生凝集现象→从而测知受试者红细胞膜上有没有A或/和B抗原→判定血型 抗体在相邻红细胞表面抗原决定簇之间搭桥形成肉眼可见颗粒状凝集团块. 试验对象: 血液 试验器材: 受检者血液 抗A、 抗B单克隆抗体 载玻片、 脱脂棉、 针、 酒精棉球、 生物显微镜、 冰箱等。 试验方法及步骤: 1.血涂片制作 用酒精棉球擦拭消毒指尖, 用采血针刺破指尖或耳垂, 从采血针眼处挤出绿豆大小血滴, 用清洁玻片面一端轻轻接触血滴, 使血滴附于玻片面上（注意勿触及皮肤, 不然血在玻片上就不能成滴）。 以左手拿该片两端, 快速用右手拿住另一载玻片一端, 在左手载玻片上由前向后接触血滴, 使两载玻片约成45°角, 轻轻移动, 使血滴成一直线, 然后由前向后推为一均匀薄片。 涂片在空气中干燥后置于染色架上, 滴加瑞氏染色液, 使涂片被染色液覆盖。 染1分钟后, 再加等量缓冲液于染色液上, 浸染约5-8分钟此时涂片表面展现一层古铜色。 用蒸馏水快速冲洗, 见涂片呈粉红色后, 自然晾干。 2.血细胞观察 制作良好血涂片厚薄适宜, 血膜分布均匀, 呈粉红色。选一厚薄适宜部位置显微镜下观察。先用低倍镜观察全片, 了解涂片染色、 细胞分布情况, 再用高倍镜观察。 红细胞 数量最多, 体积小而圆、 均匀分布, 呈红色圆盘状, 边缘厚, 着色较深, 中央薄, 着色较浅, 无细胞核、 细胞器, 胞质内充满血红蛋白。 白细胞 白细胞数量较红细胞数量少, 但胞体大, 细胞核显著, 极易与红细胞区分开。 嗜中性粒细胞 是白细胞中较多一个, 约占白细胞总数50-70%。体积比红细胞大, 关键特征是胞质中特殊颗粒细小, 分布均匀, 着淡紫红色。胞核着深紫红色, 通常分3—5叶, 叶间以染色质丝相连。核分叶多少与该细胞年纪相关, 如核为杆状, 则为嗜中性粒细胞幼稚型。 嗜酸性粒细胞 比中性粒细胞略大, 数量少, 约占7%以下。核常分两叶, 着紫蓝色。关键特点是胞质内充满粗大、 圆形颗粒, 色鲜红或桔红。 嗜碱性粒细胞 数量极少, 约占1%以下。在通常血涂片上不易找到, 体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着很多大小不一深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶, 也染成紫色, 但染色略浅, 通常都被颗粒遮盖, 形状不清 淋巴细胞 数量较多, 约占20%-40%, 可见中、 小型, 淋巴细胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据整个细胞, 染成深蓝紫色。胞质极少, 仅在核一侧出现一线状天蓝色或淡蓝色胞质。中淋巴细胞比红细胞大, 胞质较小淋巴细胞稍多, 着色较浅。核圆形或卵圆形, 位于细胞中部, 也染成深蓝紫色。 单核细胞 数量少, 约占2%-8%, 是细胞中体积最大一个, 胞核呈肾形、 马蹄形, 常在细胞一侧, 着色比淋巴细胞浅。 血小板 为形状不规则细胞小体, 其周围部分为浅蓝色, 中央有细小紫色颗粒, 常聚集成群, 分布于红细胞之间。高倍镜下通常只能看到成堆紫色颗粒, 在油镜下才能看到颗粒周围浅色胞质部分。 3.血型判定 标识凹载玻片: 左上角写A, 右上角写B。 分别吸收抗A、 抗B单克隆抗体各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。 采血针刺破左手无名指尖或耳垂, 待血液出来后, 用2支毛细滴管吸收或消毒后牙签挑取血液, 分别加入到玻片左、 右两侧单克隆抗体试剂内, 并用牙签搅拌, 使单克隆抗体试剂与血液混匀。（切勿混用毛