sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量.pptxVIP

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  • 2021-08-21 发布于上海
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sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量.pptx

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的分子量会计学实验原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联试剂N,N’-甲叉双丙烯酰胺在有引发剂(如过硫酸铵)和增速剂(如N,N,N’,N’-四甲基乙二胺,TEMED)的情况下聚合而成的。丙稀酰胺的聚合通常是由化学催化或光化学过程完成的,常用过硫酸铵、过硫酸钾或核黄素来引发这个过程,用TEMED、3-二甲胺丙腈等作为聚合过程中的增速剂。 丙烯酰胺N,N’-甲叉双丙烯酰胺实验原理聚丙烯酰胺凝胶三维结构实验原理不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳是指使用不同孔径和不同缓冲系统的电泳,它由浓缩胶和分离胶两部分所组成。由于浓缩胶的堆积(浓缩)作用,可使样品(即使是稀释样品)在浓缩胶和分离胶的界面上先浓缩成一窄带,然后在一定浓度(或一定浓度梯度)的凝胶上进行分离。不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离原理:浓缩效应 电荷效应 分子筛效应 实验原理十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)是一种阴离子去污剂,它能破坏蛋白质分子之间以及与其他物质分子之间的非共价键,使蛋白质变性而改变原有的空间构象。特别是在强还原剂,如巯基乙醇存在下,由于蛋白质分子内的二硫键被还原剂打开,不易再氧化,这就保证了蛋白质分子与SDS充分结合.蛋白质-SDS复合物在水溶液中的形状,近似于雪茄烟形的长椭圆棒。不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样,约为1.8nm,而长轴则随蛋白

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