模块三 § 3 电 泳 3. 电泳技术的几个特点 电泳技术具有设备简单、操作容易、快速、准确、易重复等特点。 既能用作物质的定性分析及定量分析,也能作为一种制备技术。 与层析和超离心一起,被称为三大分离分析技术。 几种常用的电泳 纸电泳 醋酸纤维薄膜电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) (可分为圆盘电泳和垂直平板电泳) 琼脂糖凝胶电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 等电聚焦(IEF) 双向电泳 二 琼脂糖凝胶电泳 5. 点样——在核酸样品中加入适量上样Buffer,混匀后点样。 6. 电泳 ——盖好电泳槽盖子,选择适当的电泳电压(≤5V/cm)开始电泳。 应用 图1 猪基因组DNA1%琼脂凝胶电泳图 应用 图2 PCR产物琼脂凝胶电泳图 (1、2、3、4为PCR产物,M为DL2000Marker) DNA片段从琼脂糖凝胶中的分离 实验目的及背景 在生物技术实验中,PCR反应获得的目的片段,酶切后所得特定的DNA序列, 分子杂交中所制备的探针等,经过琼脂糖凝胶电泳后,目的片段与其它DNA分开, 这就需要有一套方法将目的DNA从凝胶中分离出来 回收DNA的方法 现在常用的技术有: 电洗脱法 低熔点琼脂糖凝胶法 DEAE 滤膜插片法等 电洗脱法,经济节省,操作方便,
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