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微生物及检测知识培训 微生物常见术语 污染：是指当某物与不洁净的或腐坏物接触或混合在一起使该物体变的不纯净或不适用。简单的说当一个产品中存在不需要的物质时，即受到了污染。 无菌：不存在活的生物，它是一个绝对概念，即作不到也无法加以证实。FDA将百万分之一微生物污染率作为灭菌产品无菌的相对标准。它和蒸汽灭菌后产品中微生物存活的概率为10-6系同一标准的不同表示法。 灭菌：用物理或化学方法杀灭或除去物体上所有的微生物，包括繁殖体和芽孢。 消毒：用物理或化学方法杀灭或清除物体上的病原微生物，使其达到无害化。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏芽孢，所以消毒不是彻底的，不能代替灭菌。 常用灭菌和消毒方法 商业无菌：产品经过适度的杀菌后，不含有致病性微生物，不含有在货架期能导致产品变质的微生物，也不含有在通常温度下能在其中繁殖的非致病性微生物。 细菌的培养 细菌可以用人工方法进行培养，以研究它们的生物学特性。 为了获得良好的纯的细菌培养物，需要掌握细菌分离培养的基本技术。 细菌的分离 混合菌的细菌分离方法有多种。平板划线法和平板涂布法。 借助划线和涂布将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能固定在某一点。生长繁殖后形成单个的菌落以达到分离纯种的目的。 平板划线（四区划线） 接种环在琼脂上端来回划线，涂成一细菌薄膜，视为一区。划线时接种环与平板面呈30-40度角，以腕力在平板表面轻而快的来回滑动。 旋转平板90度，灼烧接种环，以杀灭环上的残留细菌，接种环触及培养基以冷却。接种环通过一区连续平行划线，此视为二区。 旋转平板90度，灼烧接种环并冷却。将接种环接二区连续平行划线，此为三区。 旋转平板90度，接种环可以不灭菌，接三区连续平行划线，画满平板其余部分，此为四区。 各区接种线间尽量不要相交太多，以达到细菌逐渐稀释的目的。 菌量多的话用分区划线，菌量少得话连续划线。 四区划线 菌落纯分 不蔓延生长菌划线 蔓延生长菌划线 失败 成功 倒板时温度高，凝固后平板有结晶水 平板涂布 将菌液进行一系列梯度稀释，取一定量的菌液涂布于平板上，使之分散并生子成为单个菌落。 1.将涂布帮浸入盛有酒精的烧杯中。也可以高压灭菌。 2.取少量菌液，滴加到培养基表面。 3.将沾有少量酒精的涂布帮在火焰上引燃，待酒精燃尽后冷却8-10s。 4.用涂布棒将菌液均匀涂布在培养基表面，涂布时刻转动培养皿使涂布均匀。 5.从酒精中取出涂布棒，要让多余的酒精流入烧杯，以免灼烧时火焰较大产生意外伤害。 6.操作过程中一定注意防火，不要将过热的涂布棒置于烧杯中个，以防将烧杯中的酒精引燃。 7.涂布到培养基上无肉眼可见的液滴或涂布棒与培养基接触时略感阻力。 干酪乳杆菌涂布MRS 沙门大肠混合菌涂布HE 沙门氏菌BS、HE、XLD无法判断时，可以接种显示培养基。 陆桥沙门氏菌显色培养基，目标菌属为紫红色，其它菌属为蓝绿色、绿色或无色。 Thanks