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支原体染色液(Dienes染色液)操作步骤及注意事项
货号:G0980
规格:10mL/50mL/100mL
保存:4℃避光保存, 12个月有效。
产品说明:
支原体染色液(Dienes染色液)是一种经典的利用天青美蓝染色检测支原体污染的试剂,经
常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂检测细胞含量范围一般
为0.1~1×10 之间。6
自备材料:
1、PBS或生理盐水
2、载玻片、盖玻片
3、显微镜
操作步骤(仅供参考):
(一) 贴壁细胞
1、 取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用无菌的
PBS或生理盐水洗涤3次,再用细胞培养液洗涤1次。将盖玻片置于6孔板或其他培养皿内,
接种细胞培养过夜,使融合率约为50%~80%。
2、 加入Dienes染色液覆盖表面,孵育1-2min。
3、 弃染色液,PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。
4、 显微镜下观察。
(二) 悬浮细胞
1、 低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl液体,再缓缓悬起细胞,滴加至载玻
片上,尽量使细胞分布均匀。
2、 稍晾干,使细胞贴在载玻片上不易随液体流动。
3、 加入Dienes染色液覆盖表面,孵育1-2min。
4、 弃染色液,PBS或生理盐水洗2次,每次3min,吸尽液体。
5、 显微镜下观察。
注意事项:
1、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中,对于特殊细胞,如果细胞沉淀不充分,可以
适当提高离心力或延长离心时间。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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