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最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 最佳实践规范及标准操作流程 文件汇编 （第二版） 2010 年 5 月 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 上海生物样本库 质量管理体系文件 文件名称 核酸提取和纯化控制程序 编号 SOP-SC-030-01 批 准 人 批准日期 实施日期 核酸提取和纯化控制程序 1. 目的 规定 DNA和 RNA核酸样本提取和纯化实验应遵守的操作。 2. 适用范围 从人体体液、细胞、组织等标本大批量提取和纯化 DNA和 RNA。，并包括对 核酸样本的长期保存。 3. 定义和术语 3.1 DNA Deoxyribonucleic Acid 即脱氧核糖核酸, 是遗传信息储存及传递者。 3.1 RNA Ribonucleic Acid 由脱氧核糖核酸（DNA）为模板转录合成的核糖核酸的片断。 4. 职责 4.1 样本库实验技术员负责从不同样本中提取和纯化 DNA和RNA。 5. 设备和器材 见正文内容 6. 正文 6.1 实验室设置 6.1.1 在实验室内，试剂贮存，核酸提取，核酸质量控制以及核酸样本保存 的区域应相互隔离。 严禁不同工作区内的设备物品如加样器、 试剂等的移出移进 造成不同的工作区间发生交叉污染。 6.1.2 进入各个工作区的所有人员和物品必须遵循严格的顺序，只能按单一 方向进行，即从试剂贮存和准备区→提取区→质量分析区→标本保存区。 1 最佳实践规范及标准操作流程文件汇编 V2.01 6.1.3 工作人员穿着的工作服应经常洗涤，尽量避免不同工作区内的工作服 相互混穿，造成污染。同时，应假定样本可能含有病原微生物，样本 DNA提取工 作应参考 P2级实验室操作规范进行。 6.2 工作区域功能和设备 6.2.1 试剂贮存和准备区 该工作区用于贮存溶液的制备、 溶液的分装。 本工作区仪器设备配置应包括 如下： A. 4℃冰箱和-20 ℃冰箱、混匀器、微量加样器（覆盖 1～1000μl各个容量 的加样器）、生物安全柜（带紫外灯） ； B. 专用办公用品、专用工作服和工作鞋； C. 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸 头等。 6.2.2 提取区 该工作区用于标本贮存、核酸提取。本工作区仪器设备配置应包括如下： A. 4℃冰箱、－20℃冰柜、高速台式冷冻离心机、混匀器、水浴箱或加热模 块、微量加样器（包括 1～1000μl各个容量的加样器） 、可移动紫外灯（近工作 台面）； B. 超净工作台和超声波水浴（处理大分子 DNA）, 专用办公用品、专用工作 服和工作鞋； C. 消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸 头等。 6.2.3 质量分析区 该工作区用于核酸浓度和纯度测定。本工作区仪器设备配置应包括如下： A. 核酸微量分析仪，如 Nanodrop和 Qiaxcel ；或紫外核酸分析仪及凝胶电 泳仪；微量加加样器若干支（覆盖 l ～100μl ）； B