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- 2021-08-30 发布于江苏
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流式检测细胞周期与凋亡样品处理流程
胰蛋白酶消化法收集细胞,做成单细胞悬液
1000r/min离心5min,收集沉淀。
沉淀用PBS洗2次,1000r/min离心5min,收集沉淀。
细胞沉淀用4℃预冷的70%的冰乙醇1ml重悬,4℃过夜。即可送检。
备注:1.每个细胞样品细胞量需达到106(细胞沉淀要打散,避免细胞聚集),细胞量少可能测不出结果,或结果不太准确。
2.样品可在-20℃
流式检测细胞DNA倍体样品处理流程
1.胰蛋白酶消化法收集细胞,做成单细胞悬液
2.1000r/min离心5min,收集沉淀。
3. 沉淀用PBS洗2次,加入相应种属的淋巴细胞或鸡红细胞做为内参,内参与预检测细胞的比例为1:3
4. 1000r/min离心5min,收集沉淀。
5. 细胞沉淀用4℃预冷的70%的冰乙醇1ml重悬,4
备注:1.每个细胞样品细胞量需达到106(细胞沉淀要打散,避免细胞聚集),细胞量少可能测不出结果,或结果不太准确。
2.样品可在-20℃
检测胞内蛋白上机前细胞处理流程
收集实验处理好的细胞,用PBS洗2次,2%多聚甲醛固定15min。
离心弃掉多聚甲醛,再用70%的冰乙醇固定过夜(4℃)。
离心弃掉乙醇,PB
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