总蛋白的六种检测方法.pdfVIP

好苦逼 总蛋白的六种检测方法 （一）凯氏定氮法 将血清与强酸一起加热消化， 使血清中的含氮化合物转化为铵盐， 再加碱使铵盐成为氨 进经蒸馏分离出来，最后用酸滴定测定氮量，按每克氨相当于 6.25g 蛋白质计算蛋白质的浓 度。 应用历史较久，结果较准确，是蛋白质测定的参考方法，但操作复杂，影响因素较多，且不 少蛋白质的含氮量并非 16% ，不适用于日常工作，目前多用于标准蛋白的标定及校正其它 的常规方法。 （二）双缩脲法 蛋白质中的肽键 （-CONH- ）在碱性条件下与 Cu2+络合成紫红色复合物， 产生的颜色强度在 一定范围内与蛋白质含量成正比。 此反应和二分子尿素缩合后的产物双缩脲（ H2N-CO-NH-CO-NH2 ）与碱性铜溶液作用形成 紫红色的反应相似，故称为双缩脲反应。几分子中含有两个甲酰胺基 (-CO-NH2) 的化合物都 能出现此反应。 因至少含