分生实验课件1022dna序列测定.pptxVIP

;DNA序列测定的应用;序列测定技术从60年代最早提出设想至今，已经日臻完善，测定序列的技术也越来越简化，在各项研究工作中的地位也日趋重要。 ;;DNA序列测定概述;双脱氧链终止法工作原理;Dideoxy Sequencing of DNA;Reaction Requirements forDideoxy Sequencing of DNA;; 1、制备待测DNA序列模板 2、酶促或化学反应将其转变“等差数列”（n=1） 3、电泳分离核酸片段 4、读序;Maxam-Gilbert化学裂解法基本原理;测序技术的最近发展;;Sequence Analyzer;DNA测序自动化和大规模测序; DNA自动测序与手工测序的不同点; ;pyro=pyrophosphate焦磷酸 一种全新的基于酶级联反应的新型遗传分析技术; 一套完整的实验方案； 诸多领域的广泛应用…… ;Pyrosequencing是新一代DNA序列分析技术，该技术无须进行电泳，DNA片段也无须荧光标记，可以快速、准确地测定一段较短的目标片段。操作较为简便。;基本原理;第2步：向反应体系中加入1种dNTP，如果它刚好能和DNA模板的下一个碱基配对，则会在DNA 聚合酶的作用下，添加到测序引物的3’末端，同时释放出一个分子的焦磷酸(