蛋白纯化层析技术与工艺放大.pptxVIP

蛋白纯化层析技术与工艺放大会计学一、离子交换层析技术二、亲和层析技术三、切向流过滤技术四、工艺放大一、 阴离子交换 阳离子交换分辨率:1 选择性: 填料的性质及所带功能基团的数目、pH值、离子强度、洗脱条件2 柱效： 填料颗粒大小、层析柱装填效果3 样品： 能应用的样品量即样品各成分性质二、亲和层析原理亲和层析的策略配基与目标蛋白的特异性尽可能简单设计洗脱方案抗体纯化 ——基于G蛋白/A蛋白的IgG的纯化1. LMW Markers2. Mouse cell culture, nonredued,diluted 1:103. PoolⅠ,unbound material,nonredued,diluted 1:104. PoolⅡ,purified mouseIgG1, nonredued,diluted 1:10如何除去特定的污染物三、切向流过滤技术膜过滤原理膜过滤技术，又称膜分离技术，是使用一定孔径的过滤介质将不同物质按照大小和形状进行选择性分级分离的物理分离方法。膜过滤技术的优点（1）快速高效、低能耗、硬件设备简单易于维护；（2）易于实现全自动化操作和线性放大（3）膜分离操作条件温和、不涉及相变，有利于保持生物活性分子的结构和稳定性。过滤技术的分类按照滤膜孔径范围可以分为常规过滤、微滤、超滤和反渗透等过滤技术的分类按照过滤操作方式分：死端过滤( Normal Flow