流式细胞术原理及树突状细胞的检测.pptVIP

DC标记检测注意事项 （１）因DC在低温环境下吞噬能力下降显著，标记前细胞应在4℃预冷，荧光抗体标记过程应在冰浴上操作，减少内吞荧光。 （２）洗涤细胞的PBS里应加终浓度1％的NａN3，降低DC的活性，降低非特异性结合。 （３）检测时细胞浓度相对降低，流速控制在200－300个细胞/s，降低堵塞管道机率。 （4）应以淋巴细胞亚群为参照设门，DC的前向散射信号明显强，侧向散射稍强。 　　谢谢！ 流式细胞术原理及树突状细胞的检测 概念 流式细胞术（Flow Cytometry，FCM） 利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。 流式细胞仪（Flow Cytometer) 使细胞（或其他粒子）以单个方式依次高速通过激发光束，采集细胞被光照时产生的各种信号，对信号进行处理，并对各参数进行关联分析的一种仪器。 功能特点 （１）单细胞（血液，细胞株，消化后实体瘤细胞 （2）多参数定量分析 （3）高通量、更敏感、更准确 　分析150，000个/ 秒 　 分选100，000个/秒 （4）细胞分选 高纯度：99%以上； 可分析小于1/10000比例的稀有细胞群、单细胞克隆等 Epics XL-ADC:最经典的分析型台式小机型:世界上第一台单激光四色机型