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·120 · J Clin Neurol ,April 20 17 ,Vol. 30 ,No. 2
· ·
论著
核转录因子红细胞系相关因子-2
干扰质粒构建及鉴定
,
汤武装 李杰
【 】 -2 (Nrf2) ,
摘要 目的 设计及构建小鼠核转录因子红细胞系相关因子 基因的干扰质粒 并筛选出效果
。 3 Nrf2 (RNAi) ,
最好的干扰质粒 方法 设计 组针对 基因的核糖核酸干扰 序列 应用基因重组技术克隆入载
RNA (shRNA), shRNA1、shRNA2 shRNA3 , , Lipofectamine
体中构建短发夹 分别为 及 通过基因测序鉴定 经
2000 BV2 , PCR Nrf2 mRNA ,Western Blot Nrf2 。
转染至 细胞 实时 检测 的表达 法检测 蛋白的表达 结果 测
, Nrf2 , PCR Western Blot shRNA3
序表明 克隆入载体中的 干扰序列及读码框完全正确 实时 及 显示 干扰效果
。 Nrf2 , Nrf2 。
最强 结论 成功构建小鼠 的有效干扰质粒 为 信号通路在脑卒中领域的功能研究奠定了基础
【 】 -2 ;RNA ;BV2
关键词 核转录因子红细胞系相关因子 干扰 细胞
【 】R363 【 】A 【 】1004-1648 (2017)02-0120-04
中图分类号 文献标识码 文章编号
Construction and identification of nuclear factor erythroid-2-related factor 2 gene RNA interference
recombinant plasmid TANG Wu-zhuang ,LI Jie. Dep artment of Neurology ,Yixing Hosp ital Aff iliated to Jiangsu
University ,Yixing 214200 ,China
Abstract :Objective To construct and identify the shRNA plasmid vector targeting nuclear factor erythroid-2-
related factor 2 (Nrf2),and to collect the strongest RNAi effect of Nrf2 shRNA sequence. Methods Nrf2 gene was
targeted gene. Three shRNA sequences were designe
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