复方生物黄酮实验研究论文.docVIP

复方生物黄酮实验研究论文 【摘要】目的为了研究复方生物黄酮（圣安泰牌百力康片）的潜在致突变性。方法我们对该产品进行了Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验。结果Ames实验，小鼠骨髓细胞微核实验，小鼠精子畸形实验等结果均为阴性，均未见毒性改变。结论复方生物黄酮在服用剂量内未见致突变性。 【关键词】复方生物黄酮；Ames实验；小鼠骨髓细胞微核实验；小鼠精子畸形实验 【Abstract】Inordertostudythepotentialmutationgenesisofcompoundflavine，wehaveperformedAmestests，ratmarrowosteocytemicronucleartestsandratspermdeformationtests.Theresultsareallnegative，notoxicchangeshavebeenobserved.Itisconcludedthatnomutationgenesiseffectsofcompoundbio-flavinehavebeendiscoveredinfeedingdosage. 【Keywords】compoundbio-flavine；Amestests；ratmarrowosteocytemicronucleartests；ratspermdeformationtests 随着生命科学的不断发展，人们对生物黄酮有了广泛的研究，发现黄酮类化合物具有良好的抗氧化性能［1］和清除自由基的能力［2］；具有抗肿瘤作用［3］；植物雌激素样作用；减少体内胆固醇的合成，降糖作用［4］和降低血清胆固醇浓度和对心脑血管的保护作用［5］；对细胞免疫功能和非特异性免疫功能均有提高作用。生物黄酮的种类众多，其来源不同，所发挥的生物活性也不同。根据传统中医理论以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料，辅以其他辅料制成的复方生物黄酮，可以更好的发挥黄酮的提高免疫作用，尽管这些主要原料均来源于“既食又药”的物质，但是关于复方成分的致突变性研究较少。为了研究复方生物黄酮（圣安泰牌百力康片）可能对人体造成的潜在致突变性，我们对该产品进行了Ames实验、小鼠骨髓微核实验和小鼠精子畸形实验，以期为今后开发利用我国“既食又药”的医药宝库提供科学依据。 1材料与方法 1.1样品复方生物黄酮的商品名称为圣安泰牌百力康片，由哈尔滨圣安泰生物科技有限公司提供。样品以枸杞、黄芪、银杏叶为主要原料，辅以其他辅料制成，功效成分为总黄酮。 1.2材料昆明种小白鼠（批准证号：医动字第09-2-7号），购自黑龙江省肿瘤研究所实验动物中心。TA97a、TA98、TA100和TA102四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。 1.3方法 1.3.1鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验（Ames实验）TA97a、TA98、TA100和TA102四种菌株引自美国加州大学Ames实验室。经菌株特性鉴定均符合实验要求。活化系统为PCB-五氯诱导的雄性Wistar大鼠肝s-9液。按1：9加入辅助因子（Ames1983年配方）配成10％s-9混合液，经阳性诱变剂活性鉴定符合实验要求。实验样品经XAD-11树脂柱过滤及洗脱预处理，最后以DMSO为溶剂，剂量设计分别为5mg/皿、1mg/皿、0.2mg/皿、0.04mg/皿和0.008mg/皿受试物。除上述5个剂量组外，又设未处理对照组、溶剂对照组（DMSO）和阳性对照组［加s-9用2-AF（TA102用1，8-二羟蒽醌），不加s-9用DEXON（TA100用叠氮钠）］。采用平板渗入法进行实验。在保温的顶层培养基中依次加入测试菌株新鲜增菌液0.1ml，混匀；加受试物或对照物0.1ml［需活化时加入10％s-9混合液0.5ml（含s-95μl）］，再混匀，迅速倾入底层培养基上，转动平皿使顶层培养基均匀分布在底层上，平放固化，37℃培养48h观察结果。每个剂量平行做了3皿，并重复一次，最后以3皿平均值报告实验结果。 1.3.2小鼠骨髓细胞微核实验昆明种小白鼠，体重25～30g，共50只，在本实验室适应环境7天后，随机分成5组，每组10只，雌雄各半。高剂量组剂量为10g/kgbw；中剂量组为5g/kgBw；低剂量组为2.5g/kgbw；阴性对照组经口灌胃蒸馏水；阳性对照组灌胃给予环磷酰胺，剂量为40.0mg/kgbw。按20ml/kgbw灌胃容积进行灌胃。采用30h给受试物法，即二次给受试物间隔24h，第二次给受试物后6h颈椎脱臼处死小鼠，取股骨，常规制片。显微镜双盲法阅片，每只小鼠观察1000个嗜多染红细胞（PCE），记录有微核的嗜多染红细胞数，计算出