一种核酸杂交检测方法发明专利 (1).pdfVIP

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2021-09-09 发布于浙江
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一种核酸杂交检测方法发明专利 (1).pdf

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(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 (10)授权公告号 CN 107058585 B (45)授权公告日 2021.06.08 (21)申请号 201710424228.7 审查员田原 (22)申请日 2017.06.07 (65)同一申请的已公布的文献号申请公布号 CN 107058585 A (43)申请公布日 2017.08.18 (73)专利权人浙江殷欣生物技术有限公司地址 311100 浙江省杭州市余杭经济技术开发区新颜路22号501D (72)发明人黄宝福　章喜超　章晓媛　叶德　王哲　 (74)专利代理机构北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 代理人周新楣 (51)Int.Cl. 权利要求书3页说明书5页 C12Q 1/682 (2018.01) 序列表1页附图1页 (54)发明名称一种核酸杂交检测方法 (57)摘要本发明涉及一种核酸检测方法，特别涉及一种核酸杂交检测方法，属于生物技术领域。本发明建立了一种新的核酸物质检测方法，通过该方法的建立扩大核酸检测产品在医疗、科研、食品安全等领域的使用范围。本发明方法通过基质、捕获核酸序列、目标核酸、结合核酸序列、检测核酸序列、微球、信号核酸序列和信号基团实现目标核酸的捕获和检测。相对于PCR技术需要扩增，本发明在不增加检测物浓度的前提下实现目标核酸的检测，且具有稳定性好，成本低，检测速度快，对环境要求低等优点。 B 5 8 5 8 5 0 7 0 1 N C CN 107058585 B 权　利　要　求　书 1/3页 1.一种核酸杂交检测方法，其特征在于该方法通过基质、捕获核酸序列、目标核酸、结合核酸序列、检测核酸序列、微球、信号核酸序列和信号基团实现待测目标核酸的捕获和检测：具体过程如下： S1、根据目标核酸（3）的序列AACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCC GTGGCTTTCTGGT，序列如SEQ ID No.1所示，设计捕获核酸序列（2）并修饰氨基：NH ‑(CH) ‑ 2 2 6 ACCAGAAAGCCACGGCTAACTACG，序列如SEQ ID No.2所示；设计结合核酸序列（42）和检测核酸序列（43），结合核酸序列（42）和检测核酸序列（43）的核苷酸序列相同，并修饰氨基：GCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTT‑(CH) ‑NH ，序列如SEQ ID 2 6 2 No.3所示；结合核酸序列用于与待测目标核酸结合，检测核酸序列用于与标记了信号基团的信号核酸序列结合；. 设计信号核酸序列（51）并修饰FITC基团：AACGCTTGCCACCTACGTATTACCGC，序列如SEQ ID No.4所示；所述基质（1）具体为氨基化的微孔板；所述微球（41）具体为氨基修饰的聚苯乙烯微球，直径100nm；所述信号基团（52）为FITC； S2、在氨基化的微孔板的每个孔里加入5%戊二醛100μL，室温下每10min震荡一次，