检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其应用发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112986583 A (43)申请公布日 2021.06.18 (21)申请号 202110514035.7 (22)申请日 2021.05.12 (71)申请人 珠海丽珠试剂股份有限公司 地址 519000 广东省珠海市香洲区同昌路 266号1栋、2栋、3栋、4栋 (72)发明人 张建锋　徐亮　曾敏霞　刘秀贵　 储迅涛　 (74)专利代理机构 北京超成律师事务所 11646 代理人 高荣英 (51)Int.Cl. G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) 权利要求书1页 说明书16页 (54)发明名称 检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及其 应用 (57)摘要 本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供 了一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒及 其应用。本发明提供的检测新型冠状病毒中和抗 体试剂盒，具体包括（a）或（b）两种方案：（a）示踪 物标记的RBD三聚体抗原，包被在固体支持物上 的ACE2，以及，含有0.2‑10mg/mL十二烷基二甲基 甜菜碱的工作液；（b）示踪物标记的ACE2，包被在 固体支持物上的RBD三聚体抗原，以及，含有0.2‑ 10mg/mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液；其中， RBD三聚体抗原利用二硫键将刺突蛋白的RBD与 S2亚基完全交联得到。十二烷基二甲基甜菜碱会 A 显著提高RBD三聚体抗原与新冠中和性抗体结合 3 速度，提升阳性样本平均发光强度，缩短检测时 8 5 6 间。 8 9 2 1 1 N C CN 112986583 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种检测新型冠状病毒中和抗体的试剂盒，其特征在于，包括（a）或（b）： （a）示踪物标记的RBD三聚体抗原，包被在固体支持物上的ACE2，以及，含有0.2‑10mg/ mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液； （b）示踪物标记的ACE2，包被在固体支持物上的RBD三聚体抗原，以及，含有0.2‑10mg/ mL十二烷基二甲基甜菜碱的工作液； 其中，所述RBD三聚体抗原是利用二硫键将刺突蛋白的RBD与S2亚基完全交联得到。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液包括： 0.01mol/L‑0.2mol/L 磷酸盐缓冲液，0.1‑50mg/mL牛血清白蛋白，5‑50mg/mL氯化钠，10‑50mg/mL蔗糖，0.2‑10mg/ mL十二烷基二甲基甜菜碱和0.5‑5mL/Lproclin 300，pH为6.0‑7.6。 3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液包括：浓度为0.05mol/L的磷 酸盐缓冲液，10mg/mL的牛血清白蛋白，8mg/mL的氯化钠，10mg/mL的蔗糖，0.2‑10mg/mL的十 二烷基二甲基甜菜碱和0. 5mL/L的proclin 300，pH为7.4。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述工作液中十二烷基二甲基甜菜碱的 浓度为5mg/mL。 5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，示踪物包括吖啶酯及其衍生物、辣根过 氧化物酶、碱性磷酸酶或三联吡啶钌；固体支持物包括磁性微粒、微孔滴定板、硝酸纤维素 膜或聚苯乙烯胶乳，磁性微粒包括羧基磁珠、氨基磁珠、NHS磁珠、羟基磁珠、甲苯磺酰基磁 珠或环氧基磁珠。 6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，（a）中ACE2或（b）中RBD三聚体抗原均独 立地通过生物素‑亲和素系统包被在固体支