激光扫描共聚焦显微镜在光电材料中的应用.pdfVIP

第44 卷第5 期 广 州 化 学 Vol. 44 No. 5 2019 年10 月 Guangzhou Chemistry Oct. 2019 文章编号：1009-220X(2019)05-0066-06 DOI: 10.16560/j.cnki.gzhx 激光扫描共聚焦显微镜在光电材料中的应用 涂真珍， 王韦刚 （南京邮电大学材料科学与工程学院，江苏 南京 210023 ） 摘 要：随着自然科学的发展，除了医学和生物研究领域，激光扫描共聚焦荧光显微镜（laser scanning confocal microscopy, LSCM ）在材料科学研究中的作用越来越显现出来，特别在光电材料的研究中具有 广泛的应用。结合多年的仪器管理和使用经验，以本学院的奥林巴斯激光扫描共聚焦荧光显微镜 FV1000 为例，对 LSCM 的成像特点、技术优势及其在光电材料成像中的应用情况进行了概述，以期 能为LSCM 在更多领域的应用和研究工作提供参考。 关键词：激光扫描共聚焦荧光显微镜；光电材料；成像 中图分类号：Q336 文献标识码：A 激光扫描共聚焦荧光显微镜，简称LSCM，因其高分辨率和深度层析成像的优势而受到关注，具有对 [1] 活细胞和生物组织样品进行无损实时观测的特点，因此成为生物和医学领域检测荧光材料的有力工具 。 光电材料指的是制造光电设备的一类材料，具有发射、传输、接收、处理、显示和存储光电信息的功能， 其发展极为迅速。纳米光电材料是光电材料的一大分支，属于新型的功能化纳米材料与有机/无机纳米杂化 材料，既可以研究其对光电性能的影响及原理，也可以用这一类材料设计高性能、新功能的光电器件。生 物光电材料为一类具有优异的光、电、磁等性能，可用于制备高效、便捷的生物医学检测器件的光电材料。 目前的研究热点是开发全新的分子与纳米探针光电材料，对其在生物医学成像中的应用展开研究。 本文以南京邮电大学材料科学与工程学院分析测试中心的日本奥林巴斯 （OLYMPUS ）激光扫描共聚 焦荧光显微镜 （型号：FV1000 ）为例，对激光扫描共聚焦荧光显微镜的技术优势、成像特点及其在光电材 [2] 料科学研究中的应用情况进行阐述 。 1 LSCM 光学成像原理和LSCM （FV1000 ）配置 1.1 LSCM 光学成像原理 LSCM 作为使用率极高的大型高精密仪器，在自然科学研究中的作用越来越受到重视。与普通光学显 微镜相比，LSCM 在空间分辨率、非介入无损伤实时光学切片、三维成像等方面有着显著的优势[3] 。将其 用于细胞和组织切片的形态定位、立体结构重组、生化功能动态变化过程观测等都已成为当前的研究热点。 整个成像系统包含激光光源部分、显微镜部件、扫描单元、数字信号处理系统、计算机以及图像处理软件 等。LSCM 的技术特点是，在激光器光源后面设置了一个 “照明针孔”，检测器前面设置了一个 “探测针 孔”，二者成共轭关系，即光源的光通过 “照明针孔”后聚焦在样品焦平面的某个点上，该点被激发出来 的光信号通过“探测针孔”后被电荷耦合元件 （CCD ）或光电倍增管 （PMT ）逐线或逐点接收转化为电信 收稿日期：2019-06-17 基金项目：南京邮电大学2016 年实验室工作研究课题（2016XSG04 ）；国家自然科学基金青年基金项目）。 作者简介：涂真珍 （1982~ ），女，江西鹰潭人，博士，高级实验师；主要从事光学工程及仪器设备管理工作。iamzztu@njupt.edu.cn 万方数据 第5 期 涂真珍等：激光扫描共聚焦显微镜在光电材料中的应用 67 号，经过计算机的数字信号处理系统对电信号进行处理后转化为