公共场所微生物检验作业指导书.docx

公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物 第 公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物 第1次修订 公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物 第 公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物 第1次修订 作业指导书 编号：ZQCDC/ZY02 第1页 共1页 公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法大肠 菌群测定操作规程 第1次修订 实施日期：2011年5月1日 1、目的 依据GB/-2000公共场所茶具微生物检验方法大肠菌群测定，熟练掌握此 规程，保证检验 结果的准确性。 2\适用范围 本标准规定了公共场所公用毛巾、床上卧具大肠菌群的测定方法。 3、 责任 使操作者熟悉此规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结果准确性。 4、 内容： 定义：大肠菌群 指一群在37C、24h能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌痒的革兰氏阴性无芽胞杆 该菌主要来源于人畜粪便，故以次作为粪便污染指标来评价公用毛巾、床上卧具的卫生质 量。 仪器：见GB/T- 2000中第3章。 培养基和试剂：见GB/T -2000中第4章。 检验程序：见GB/T -2000中第5章。 4.5.1采样方法 4.5.1采样方法 4.5.1.1随机法: 4.5.1.2涂抹法： 4.5.1.3纸片法： 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。 用测定细菌总数时采集的样品，无需重采。 用灭菌生理盐水湿润5cmx 5cm大肠菌群快速测定纸片两 张，分别贴在毛 巾、床上卧具规定部位和面积范围内，约30s后取下，置于无菌塑料袋内。 4.5.2检验方法 4.5.2.1发酵法 用测定细菌总数剩余的检样，倒入双料乳糖胆盐发酵培养液中。置36C± 1C培养箱 内培养24ho 观察是否产算、产气，若有变黄和气体产生，该管推测是检验阳性。如不产酸、产 气则为大肠菌群阴性。 自推测性检验阳性管中取一接种环培养液，转种伊红美蓝琼脂平板 上，置36C+ 1C培养箱培养18?24h,然后取出，观察菌落形态，并做革兰氏染色和证实性试验。 在上述平板上，挑取可疑大肠菌群菌落 1?2个进行染色镜检； 同时接种乳糖发酵管，只36C± 1C培养24ho 4.5.3纸片法 将已采样的纸片置36C± 1C培养箱内培养16?18h,观察结果。 结果报告 见GB/—2000中第7章。 作业指导书编号：ZQCDC/ZY03 作业指导书 第1页 共2页 检验方法细菌总数测定操作规程 实施日期： 检验方法细菌总数测定操作规程 实施日期：2011年5月1日 检验方法细菌总数测定操作规程 实施日期： 检验方法细菌总数测定操作规程 实施日期：2011年5月1日 1、目的: 公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物检验方法细总数测定。 公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物检验方法细 总数测定。 2、适用范围: 本标准适用于公共场所浴盆、脸（脚）盆细总数的测定。 本标准适用于公共场所浴盆、脸（脚）盆细 总数的测定。 3、 责任： 使操作者熟悉本规程，并在具体样品检验中严格遵照操作，确保检测结果准确性。 4、 内容 定义 细菌总数：指公共场所浴盆、脸（脚）盆经过采样处理，在一定条件下培养后（培养基成 分、培养温度、培养时间、 PH值、需氧性质等），25cmi表面上 含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性 需氧菌落总数。 细菌总数可作为判定公共场所浴盆、脸（脚）盆被污染程度的标志，也可 以为公共场所浴 盆、脸（脚）盆消毒效果的判定和评价提供依据。 仪器 见GB/—2000中第四章 培养基和试剂 431营养琼脂培养基 见 GB/— 2000 中 4.3.2 无菌生理盐水：分装125mL瓶供浴盆采样，50mL瓶供脸（脚）盆采 样。 米样 121C 20 分钟。 121C 20 分钟。 4.4.2采样部位，选择在盆内侧壁二分之一至三分之一高度采样。 4.4.3采样布点，浴盆可在四壁及盆底呈梅花布点，脸（脚）盆可在相对 两侧壁布点。 4.4.4米样方法 4.4.4.1涂抹法：用侵有无菌生理盐水的棉拭子在规格板（5cmx5cm）内来回均匀涂满 整个方格，并随之转动棉试子，剪去手接触部位后，将涂抹浴盆的5个棉试子一并放入125mL生 理盐水烧瓶中，涂抹脸（脚）盆的2个棉试 子一并放入50 mL生理盐水三角烧瓶中，充分振摇或 在旋涡振荡器上振荡 分钟，每毫升的菌浓度相当于1平方厘米的菌量。 4.4A.2斑贴法：将5cmx5cm无菌滤纸片放入灭菌平皿中，注入灭菌生理盐水1 mL片 （吸满为止），以无菌操作将滤纸片贴到采样部位，1分钟后按序取下，将贴浴盆的5片滤纸一并 放入125,mL生理盐1分钟，每毫升的菌尝试相当 于1平方厘米的菌量。 检验方法 4.5.1用1 mL灭菌吸管吸取样品1 mL加到灭菌平皿内，同样再吸1 mL加到 编号：ZQCDC/ZY 编号