生物 叶绿体的分离与观察.pptVIP

叶绿体的分离与观察 将组织匀浆后悬在等渗的介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，分批收集就能获得各种亚细胞组分。 叶绿体的分离应在等渗溶液中进行,以免渗透压的改变使叶绿体受到伤害。将匀浆液在一定的条件下离心，以去处其中的组织残渣和一些未被破碎的完整细胞。然后，在相应的条件下进行再次离心，即可以获得沉淀的叶绿体（混有部分细胞核）。分离过程最好在低温的条件下进行；如果在室温下，要迅速分离和观察。 叶绿体的分离与观察 通过植物叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理； 观察叶绿体的形态特征。 叶绿体的分离与观察 １．仪器、用具 普通光学显微镜、普通离心机、组织捣碎机、粗天平、大烧杯、量筒、滴管、刻度离心管、纱布等 ２．材料 新鲜菠菜 ３．试剂 0.35mol/l氯化钠溶液 叶绿体的分离与观察 菠菜叶手切片观察 1. 用刀片将新鲜的嫩菠菜叶切削一斜面置于载玻片上，滴加0.35mol/l氯化钠溶液，加盖片后轻压。 2. 在普通光学显微镜下观察。要注意区分三种细胞：表皮细胞、保卫细胞和叶肉细胞。 叶绿体的分离与观察 1. 选取新鲜的菠菜叶，洗净擦干后去除叶梗和粗 脉，称40g于200ml0.35mol/l氯化钠溶液中，装入组织捣碎机。（全班合用） 2. 利用组织捣碎机低速(5000r/min)匀浆3-5min。 3. 将匀浆用6层纱布过滤于烧杯中。 4. 取滤液1ml在台式冷冻离心机内1000r/min下离心2min，弃去沉淀。 5. 将上清液在台式冷冻离心机内3000r/min下离心5min，弃去上清液，沉淀即为叶绿体。 6. 将沉淀用少量0.35mol/l氯化钠溶液悬浮。 7. 取叶绿体悬液一滴滴于载玻片上，加盖片后在普通光学显微镜下观察。叶绿体为绿色橄榄形，在高倍镜下可以看到内部的深绿色的小基粒。 叶绿体的分离与观察 实验报告：描述在普通光学显微镜下观察到的叶绿体的形态并画图；写好实验注意事项。 * * *