公共场所毛巾床上卧具微生物检验方法.doc

公共场所毛巾床上卧具微生物检验方法 细菌总数测定 GB/T 18204.4—2000 1 定义 ： 细菌总数：指被检物品经过采样处理，在一定条件下培养后，（培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等）25 cm2表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。 细菌总数主要作为判定公用毛巾、床上卧具被污染程度的标志，检测细菌总数，为公用毛巾、床上卧具清洗消毒效果的判定和评价提供依据。 2 操作步骤 2.1 采样方法 2.1.1 随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。 2.1.2 用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在毛巾、枕巾对折后两面的中央各25 cm2(5 cm×5 cm)面积范围}床单、被单在上下两部各25 cm2面积范围内有顺序地来回涂抹，用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放人10 mL生理盐水内，4h内送检。 2.2检验方法 2.2.1将放有棉拭子的试管充分振摇。此液为1:10稀释液。 2.2.2以无菌操作，吸取2 mL检样，分别注入到两块灭菌平皿内，每皿1 mL。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1 mL加到9 mL灭菌生理盐水中，混匀，此液为1:100稀释液。每个稀释度做两块平皿。 2.2.3将已融化冷至45℃左右的营养琼脂培养基倾入平皿，每皿约15 mL，并立即旋摇平皿。冷凝后放36℃±1℃培养箱培养48 h。 3 菌落计数方法：M=k·n/2 式中：M— 细菌总数，cfu/25K— 稀释倍数; n— 平均菌落数。