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酶的特性实验 酶的特性实验 一、目的 酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的 催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性以及 pH 、 温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代 谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。 二、实验原理 酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度特异 （专一）性，即一种酶只能对一种底物或一类底物（此类底 物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底 物无催化反应。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都是催化糖苷键 的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。 还原糖产物可用班乃德试剂鉴定。 通过比较淀粉酶在不同 pH 、不同温度以及有无抑制剂或激 活剂时水解淀粉的差异，说明这些环境因素与酶活性的关 系。 唾液淀粉酶对淀粉的水解过程如下： 淀粉 蓝色糊精 红色糊精 无色糊精 麦芽糖 与碘反应： 蓝色 蓝紫色 红色 无色 无色 三、 试剂和器材 （一）、试剂 1、2%蔗糖溶液：用分析纯蔗糖新鲜配制。 2、0.5%淀粉溶液 （二）、材料 (1) 唾液淀粉酶溶液： 先用蒸馏水漱口， 再含 10ml 左右蒸馏 水，轻轻漱动， 2 分钟后吐出收集在烧杯中，纱布过滤，即 得清澈的唾液淀粉酶原液，根据酶活高低稀释 50 倍，即为 唾液淀粉酶溶液。 (2) 蔗糖酶溶液：取 1g 鲜酵母或干酵母放入研钵中，取蒸馏 水 12ml ，分次加入，边加边研磨约 10 钟，用漏斗加滤纸过 滤，滤液加 2 倍蒸馏水稀释。 （三）、仪器 恒温水浴（ 37 ℃）、沸水浴（ 100℃）、冰浴（ 0℃）、试管、 吸管、 2ml 、5ml 、量筒、比色板、胶头滴管等。 四、操作方法 （一）、酶催化的专一性 取 6 支干净试管，按下表操作：操作项目 管号 1 2 3 4 5 6 0.5%淀粉 (ml) 1 1 0 0 1 0 2%蔗糖 (ml) 0 0 1 1 0 1 稀释唾液 (ml) 1 0 1 0 0 0 蔗糖酶溶液 (ml) 0 1 0 1 0 0 蒸馏水 (ml) 0 0 0 0 1 1 酶促水解 摇匀， 37℃水浴中保温 10-15min 班乃德试剂 (ml) 2 2 2 2 2 2 反应 摇匀，沸水浴中加热 5～ 10min 结果（颜色） （二）、温度对酶活力的影响 取 3 支试管，按下表操作：操作项目 管号 1 2 3 0.5%淀粉溶液 (ml) 2 2 2 稀释唾液 (ml) 1 1 1 温度预处理 5min