《环境微生物学实验》教学大纲.docVIP

— PAGE 4 — — PAGE 1 — 《环境微生物学实验》教学大纲 Environmental microbiology experiment 一、基本信息 实验课程名称 环境微生物学实验 课程代码 CB154014 实验课程性质 专业课程 学 分 1.0 学 时 16 开课单位 资环学院 适用专业 环境工程、环境科学、环境生态工程 先修课程 《分析化学》、《有机化学》 后续课程 《水污染控制工程实验》、《大气污染控制工程实验》、《固体废物处理处置实验》 主要教学 参考书 选用的教材： 王家玲，《环境微生物学》，高等教育出版社， 2004年，第2版。 主要参考书： [1] 郑平，《环境微生物学实验指导》，浙江大学出版社，2005年，第2版。 周群英，高廷耀，《环境工程微生物学》，高等教育出版社，2009年，第2版。 二、教学目的 （一）知识目标 ：通过本课程的学习，要求学生进一步加深理解理论课程教学的相关内容。 （二）能力目标 ：要求能熟练对微生物进行制片及染色观察，掌握显微镜的使用方法；掌握培养基的配制与灭菌方法，掌握特定功能微生物的纯种分离与接种技术等。 （三）素质目标：通过本课程的学习，要求学生能熟练掌握环境微生物学实验的基本操作技能及有关利用微生物降解环境中的污染物和环境监测中微生物学的相关方法，具有在相关行业中顺利开展工作的业务能力。 三、基本要求 （一）了解环境微生物学的常用实验操作技术及特定功能微生物的分离培养技术。 （二）理解微生物制片及染色技术，观察培养微生物的方法，培养基的配制与灭菌，纯种分离与接种技术等基本实验操作所利用的原理。 （三）掌握环境微生物学实验的基本操作技能及有关利用微生物降解环境中的污染物和环境监测中微生物学的相关方法。 四、实验项目设置情况 序号 实验项目名称 学时 开出要求 实验项目类型 必做 选做 验证 综合 设计 创新 1 显微镜的使用及典型细菌形态的观察 4 必做 验证 2 培养基的制备和灭菌 4 必做 验证 3 水中细菌总数的测定 4 必做 验证 4 土壤环境功能微生物的分离、筛选与纯化 4 必做 设计 五、各实验项目教学内容 实验项目一：显微镜的使用及典型细菌形态的观察 4学时 （一）实验目的要求 1.掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养。 2.掌握革兰氏染色方法，熟悉常见细菌、放线菌的个体形态，学会生物图的绘制。 （二）实验材料和仪器设备 仪器：普通光学显微镜（CX21）、超净工作台 耗材：载（盖）玻片、擦镜纸 试剂：香柏油、30%乙醚酒精、草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、 95%乙醇、蕃红染液、乳酸石炭酸棉蓝染液等 实验材料：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、放线菌培养平板等。 （三）实验内容 显微镜的结构及其使用方法介绍——革兰氏染色（涂片→初染→媒染→乙醇脱色→复染→干燥并镜检）——显微镜的清洁护理 （四）思考题： （1）使用油镜时，为什么要先用低倍镜观察？ （2）使用显微镜油镜观察为什么能提高分辨力？ （3）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？ （4）画出你所看到的细菌基本形态。 实验项目二：培养基的制备和灭菌 4学时 （一）实验目的要求 了解培养基配制的基本原则， 掌握?PDA 培养基（或高氏一号培养基或牛肉膏蛋白胨培养基） 的配制方法。 了解学习干热灭菌、 高压蒸汽灭菌、 紫外线灭菌和微孔滤膜除菌的原理和应用范围。 （二）实验材料和仪器设备 试剂：牛肉 膏，蛋白 胨，琼脂，可溶性淀粉，葡萄糖， 蒸馏水， NaCl， MgSO4?7H2O? FeSO4·7H2O， 1mol/LNaOH， 1mol/LHCl 等。 设备：培养基分装器、天平、高压蒸汽灭菌锅。 耗材：三角瓶、试管、橡胶塞、封口膜、培养皿、牛皮纸等。 （三）实验内容 称量→溶化→调 pH→定容→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→搁置斜面→无菌检查 （四）思考题 （1） 高压蒸汽灭菌开始之前， 为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后， 为什么待压力降至“0”时才能打开排气阀，开盖取物？ （2）在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，怎样杜绝一切不安全的因素？ （3）灭菌在微生物实验操作中有何重要意义？ （4）黑曲霉的孢子与芽孢杆菌的芽孢对热的抗性哪个最强？为什么？ 实验项目三：水中细菌总数的测定 4学时 （一）实验目的要求 掌握平板菌落计数的原理和方法。 （二）实验材料和仪器设备 菌液：大肠杆菌菌悬液 培养基：营养琼脂培养基，无菌生理盐水 1ml、10ml无菌移液管，无菌培养皿等 （三）实验内容