现代生物技术在植物育种上的应用基本知识点.pptVIP

1960年，Kocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功 1971年，Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株 1972年，Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，是第一个植物细胞杂种 1974年，Kao将聚已二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并取得了相应的融合技术 1978年，Melchers获得第一个属间细胞杂交（马铃薯+蕃茄） 1981年，Zimmerman发明电融合仪，并首次年出电融合概念 1987年，Schweiger建立单对原生质体电融合技术程序 体细胞和有性杂交的比较 比较内容 体细胞杂交 有性杂交 时 间 无季节限制 花期限制，特别是母本的花期 亲缘关系 一定程度上可以克服有性/嫁接不亲和性 受亲和性影响 结 果 细胞核、细胞质均可以重组、倍性增加 双受精，一般无细胞质重组，倍性不改变 理论上，任何细胞都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源，这对种质资源的开发和利用具有深远意义 融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径 体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组，从而产生新的核外遗传系统 原生质体培养和体细胞杂交的应用 获得新品种 创造新种质 转移有利性状和克服远缘杂交的障碍 作为基因工程的良好受体及进行突变体筛选的优良原始材料 五、植物细胞突变体的离休筛选 基因组突变：染色体数目的改变或细胞质基因组的增减 染色体突变：染色体较大范围的结构变化，涉及多个基因 基因突变：指范围在一个基因以内的分子结构的改变，按DNA改变方式有碱基置换、称雄突变、缺失突变和插入突变 （一）突变体的产生 在离体培养条件下，诱发突变的突变型和自发突变没有本质上的差别，一般有三个水平的突变： （二）突变细胞的筛选方法 直接选择法 正选择/负选择 间接选择法 正选择 用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出突变体。如除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。目前采用这一途径已从多种植物中筛选出可利用的体细胞变异体。 负选择 一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选方法 Dorffling等以Pro类似物羟脯氨酸（HYP)为选择剂，获得了耐HYP的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且能稳定遗传 林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬浮细胞经γ射线照射，然后在高浓度散打脯氨酸培养基中培养筛选，获得了抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提高1.4度和2.4度，突变系体内的Pro含量比供体增加了一倍 （三）突变性状遗传基础及其稳定性鉴定 遗传基础 稳定性 突变性状的遗传学基础 体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平上的变异 从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸型变异，真正可利用的染色体变异十分有限 基因水平上的变异大多只是个别性状的改变，不会影响再生植株的正常生长发育。因此，从再生植株的 这些变异中有可能筛选有益的变异。 基因水平的变异从根本上讲是DNA大项突变或修饰状态的改变 突变性状的稳定性 对于单基因控制的遗传性状，大多数碱基突变可以稳定遗传而且符合孟德尔遗传分离规律，这一点已在水稻、烟草和玉米的体细胞变异中得以证实。 植物的许多性状特别是经济性状均由多基因控制，对于多基因控制性状的碱基突变可能由于技术上的复杂性，目前还没有关于多基因控制性状的碱基突变报道。 第二节 基因工程与育种 Genetic Engineering and Breeding 植物基因工程：指以类似工程设计的方法，按照人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息的DNA片段，在离休条件下，用工具酶加以剪切、组合和拼接，再将人工重组的基因引物适当的植物受体中进行复制和表达的技术。 转基因植物（transgenic plants) 转基因技术(transgenic technique) 基因工程 基因枪和农杆菌介导基因转化示意图 生物技术在植物育种中的应用 主要内容 生物技术的概念和范围 细胞工程与育种 基因工程与育种 分子标记辅助育种 生物技术 生物技术也称生物工程，是指以现代生命科学为基础，结合先进的工程手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计，发行生物体或加工生物原料，为人类生产出所需的产品或达到某种目的的一门新兴、综合性学科。 生物技术是在分子生物学和细胞生物学基础上结合现代工程学的方法和原理而发展起来的一门综合性科学技术 应用范围广泛：医药卫生、农