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细菌培养与革兰氏染色 傅琳 傅学钢 1.细菌革兰氏染色法 了解革兰氏染色原理 掌握革兰染色的方法 Click to add title in here 1 2 一.实验目的 二、实验材料 菌种：大肠杆菌、土壤提取菌 染料：草酸铵结晶紫液、卢戈氏碘液 95％乙醇、番红染液 其他：显微镜、载玻片、接种环、酒精灯、无菌生理盐水 四、方法与步骤 操作过程如下： 涂片 → 干燥 → 固定 → 草酸铵结晶紫染色（约1min） → 水洗 → 卢戈氏碘液媒染（约1min）→ 水洗 → 95%乙醇脱色（约30s） → 水洗 → 番红复染（1min）→ 水洗 →干燥 → 镜检 方法与步骤 关键点： 严格掌握乙醇脱色程度，如脱色过度，则阳性菌被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌被误染为阳性菌； 菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间很长，或已死亡及部分自行溶解了，都常呈阴性反应。 方法与步骤 五、实验内容 1.对大肠杆菌、土壤提取菌分别进行革兰氏染色。 2.对大肠杆菌、土壤提取菌混合涂片进行革兰氏染色。 革兰氏阴性（G-） 实验内容 枯草芽孢杆菌（G+） 实验内容 阳性菌 实验内容 一种未知的霉菌 二、细菌培养法 实验目的 1、学习和掌握细菌分离与培养的各种基本技术 2、进一步熟悉和掌握微生物的无菌操作技术 实验仪器和材料 1、仪器： 接种环、酒精灯、记号笔、试管架等 2、材料： 普通琼脂平板培养基、斜面培养基 液体培养基、大肠杆菌菌落、土壤提取菌落 2.细菌培养法 平板划线法 斜面培养法 液体培养法 本实验的细菌培养法 细菌培养 平板划线接种法 步骤： 标记→灭菌接种环→取菌种→分离划线接种细菌（分为四个区域） →划线完毕，放入恒温箱培养 * *
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