基因工程的基本工具和基本操作程序.pptx

第十单元 现代生物科技专题 第41课时 基因工程的基本工具和基本操作程序 高频考点突破 考点一 基因工程的概念理解和理论基础 1.基因工程的概念理解 (1)操作环境：体外——关键步骤“表达载体的构 建”的环境。; (2)优点 ①与杂交育种相比：克服远缘杂交不亲和障碍。 ②与诱变育种相比：定向改造生物性状。 (3)操作水平：分子水平。 (4)原理:基因重组。 (5)本质:甲(供体提供目的基因) 乙(受体表达 目的基因),即基因未变、合成蛋白质未变,只是合 成场所的转移。;2.基因工程的基本原理和理论基础概括如下图 提醒 若题目强调“目的基因”的表达过程,则只 包括“转录和翻译”两个过程,不包括目的基因的 复制。;对位训练 1. 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和 表达其遗传特性,只有通过鉴定与检测才能知道。 下列属于目的基因检测和鉴定的是 ( ) ①检测受体细胞中是否有目的基因 ②检测受体 细胞中是否有致病基因 ③检测目的基因是否转 录出了mRNA ④检测目的基因是否翻译成蛋白质 A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④;2.科学家通过基因工程的方法，能使大肠杆菌产生 人的胰岛素。以下叙述错误的是 （ ） A.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入 了重组质粒 B.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达 C.DNA连接酶和限制性核酸内切酶都是构建重组 质粒必需的工具酶 D.目的基因的检测与鉴定表达过程中没有发生碱 基互补配对;考点二 基因工程的操作工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)化学本质：蛋白质。 (3)作用 (4)作用特点：特异性,即限制酶可识别特定的脱 氧核苷酸序列,切割特定位点。 (5)切割方式; 提醒 ①切割的化学键为磷酸二酯键。 ②在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶, 目的是产生相同的黏性末端。 ③将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制 酶,同时产生4个黏性末端。 ④不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末 端都相同,同一个DNA分子???不同的限制酶产生的 黏性末端不相同。; 2.DNA连接酶——“分子缝合针” ; 拓展提升 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较;3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” (1)类型 提醒 ①质粒本质是DNA,不是细胞器;②特点:小 型环状。 (2)功能：将目的基因导入受体细胞。 (3)应具备条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制； ②有一个至多个限制酶的切割位点,以便于与外源 基因连接； ③有特殊的遗传标记基因,供重组DNA的检测和鉴定。; 提醒 ①一般来说,天然载体往往不能满足人类的 所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某 些天然的载体进行人工改造。 ②常见的标记基因有抗生素基因、产生特定颜色 的表达产物基因、发光基因等。 ③作为载体必须具有多个限制酶切点,而且每种酶 的切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别 单一切点,若载体上有一个以上的酶切点,则切割 重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制起 点区,则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载; 体若只有某种限制酶的一个切点,则酶切后既能把 环打开接纳外源DNA片段,又不会丢失自己的片段。 ④注意与细胞膜上载体的区别,两者的化学本质和 作用都不相同。 ⑤质粒能自我复制,既可在自身细胞、受体细胞也 可在体外复制。;对位训练 3.下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是 （ ） A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸 二酯键 B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新 形成磷酸二酯键 C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接 起来，而不能将双链DNA片段平末端之间进行 连接;考点三 基因工程的基本操作程序 1.基因工程图解:抗虫棉的培育过程;2.基本操作程序 (1)目的基因的获取 ①从基因文库(基因组文库或cDNA文库)中获取; ②人工合成目的基因:常用的方法有化学合成法和 反转录法。 化学合成法:蛋白质 氨基酸序列 RNA 碱基序列 DNA碱基序列 用4种脱氧核 苷酸人工合成目的基因 反转录法:分离出