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发酵工程 南阳师范学院 生命科学与技术学院 课程导入 课程导入 第一章介绍了发酵工程总论,第二章和第三章分别学习了各种类型的发酵设备和发酵工业原料处理及配制。 本节课的重点和难点 本节课的重点 1、 发酵工业的灭菌方法 2、发酵培养基的灭菌方法 3、连续灭菌和批式灭菌 第四章 发酵工业灭菌 第四章 发酵工业灭菌 1.1 化学灭菌 1.2 辐谢灭菌 1.3 干热灭菌 1.4 湿热灭菌 1.5 过滤灭菌 化学灭菌的机理 一些化学物质与微生物细胞中的某种成分产生化学反应,如使蛋白质变性、核酸的破坏、酶类失活、细胞膜透性的改变而杀灭微生物。 湿热灭菌的机理 借助蒸汽释放的热能使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键,特别是氢键受到破坏,引起不可逆的变性,使微生物死亡。在有水分存在的情况下,蛋白质更易受热而凝固变性。 湿热灭菌的温度和时间需根据灭菌对象和要求来决定。 过滤除菌的方法 用0.01~0.45 μm孔径滤膜对压缩空气、酶溶液、啤酒及其他不耐热化合物溶液除菌。 第四章 发酵工业灭菌 2.1 发酵培养基的灭菌 2.2 发酵设备的灭菌 2.1.1 发酵培养基的灭菌方法 1) 分批灭菌 优点:不需要其他设备,操作简单易行,规模 较小的发酵罐往往采用分批灭菌的方法。 2) 连续灭菌 概念:是将培养基通过专门设计的灭菌器,进行连续流动灭菌后,进入预先灭菌过的发酵罐中的灭菌方式,也称为连消。 条件:在短时间加热使料液温度到灭菌温度126-132℃,在维持罐中保温5-8 min,快速冷却后进入灭菌完毕的发酵罐中。 2) 连续灭菌 优点: 常见的连续灭菌的流程 连消塔—喷淋冷却连续灭菌流程 喷射加热连续灭菌流程 薄板换热器连续灭菌流程 连消塔—喷淋冷却连续灭菌流程 2) 培养基的连续灭菌 喷射加热连续灭菌流程 薄板换热器连续灭菌流程图 3) 固体培养基的灭菌 固体培养基少 采用常规的温热灭菌 固体培养基量较大 土蒸锅: 锅内温度达98℃以上,计时灭菌2 h,自然冷却(闷锅)。 转鼓式灭菌器(酱油厂和酒厂) 1 )培养基成分 2)培养基成分的颗粒性 3)培养基的pH 4)微生物细胞的含水量 2.1.3 培养基灭菌时间的计算 理论灭菌时间的计算(对数残留公式) N0 τ=2.303/k log — N 2.1.3 培养基灭菌时间的计算 灭菌温度与菌死亡反应速度常数的关系阿累尼乌斯公式: K=A·exp-△E/RT K—菌死亡的速度常数 A—阿累尼乌斯常数 exp—2.71 △E—杀死细菌孢子的活化能( J/K ·mol ) R—气体常数[8.314J/( mol·K)] T—绝对温度(K) 2.1.3 培养基灭菌时间的计算 活化能大的反应中,反应时间随温度变化也大 杀死细菌和芽孢的活化能远大于营养成分被破坏的活化能(EE’) 2.1.3 培养基灭菌时间的计算 采用高温短时的灭菌方法可以减少养分的破坏。 2.1.3 培养基灭菌时间的计算 2.2 发酵设备的灭菌 发酵设备的灭菌包括发酵罐、管道和阀门、空气过滤器、补料系统、消沫剂系统等的灭菌。 通常选择0.15-0.2 MPa的饱和蒸汽,这样可以较快使设备和管路达到所要求的灭菌温度,又使操作安全。 灭菌开始时,必须注意把设备和管路中的空气排尽,否则达不到应有的灭菌温度。 各管路在灭菌前,要进行气密性试验,以防泄漏。 本节课小结 本节课作业题 本节课学习了发酵工业常用灭菌方法及发酵培养基及设备的灭菌方法,下节课将讲授无菌空气的制备,掌握发酵工业无菌空气制备的方法。 继续学习的参考书及网站 1 李玉英. 发酵工程 [M]. 北京: 中国农业大学出版社, 2009. 2 李艳. 发酵工程原理及技术 [M]. 北京: 科学出版社, 2008. 3 罗大珍,林稚兰. 现代微生物发酵及技术教程 [M]. 北京: 北京大学出版社,2006. 4 刘振宇. 发酵工程技术与实践 [M]. 上海: 华东理工大学出版社, 2007. 5 陈洪章. 生物过程工程与设备 [M]. 北京: 化学工业出版社,2003. 6 袁洽. 实用消毒灭菌技术[M].
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