医学检验教材课件30第六章-第1节-造血干细胞的采集与计数.pptVIP

第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 新乡医学院 牛新清 第六章 造血干细胞移植相关检验技术 第一节 造血干细胞的采集与计数 一、外周血造血干细胞动员与采集 二、造血干细胞计数 目录 第一节 造血干细胞的采集与计数 造血干细胞移植（hemapoietic stem cell transplantation, HSCT）就是将供者的造血干细胞取 出体外作为移植物（graft），然后回输移植给经过预处 理的受者，重建受者造血和免疫系统的过程。 根据造血干细胞来源的组织和器官不同，HSCT可分为： 脐血移植 （CBT） 骨髓移植（BMT） 外周造血干细胞移植（PBSC）。 概述 第一节 造血干细胞的采集与计数 根据造血干细胞的供体，HSCT 可分为： 自体（Auto-）移植 同种同基因（Syn-）移植 同种异基因(Allo）移植： 血缘供者（sibling donor）移植 非血缘供者（unrelated donor）移植 按供受者之间人类白细胞抗原（HLA）相配程度又可分为： HLA相配移植（HLA-matched transplantation） HLA半相合移(haploidentical Transplantation) HLA不配移植（HLA-mismatched transplantation） 概述 第一节 造血干细胞的采集与计数 1．造血干细胞动员 造血干细胞动员是指将造血干/祖细胞从骨髓中动员到外 周血的过程。动员方法包括应用造血生长因子、骨髓抑制性 化疗，以及骨髓抑制性化疗加造血生长因子。 一、外周血造血干细胞动员与采集 第一节 造血干细胞的采集与计数 2．外周血干细胞的采集和保存 (1) PBSC采集：采用全自动血细胞分离机连续分离外周血中单个核细胞。成人PBSC单采时血液流速一般为50～70ml/min，循环总量为10～15L（2～3倍自身血液容量）。 (2)PBSC处理：每次采集PBSC的总体积为150～400ml，循环血量15L时采集的有核细胞数约为（10～80）×109个，其中90%以上为单个核细胞，CD34+细胞占0.1%～5.0%，还有少量分叶核细胞、红细胞，红细胞含量一般不超过15ml；肿瘤患者的自体PBSC中，还可能混有少量肿瘤细胞。 一、外周血造血干细胞动员与采集 第一节 造血干细胞的采集与计数 目前，常用国际血液治疗与移植工程学会 （International?Society of Hematotherapy and Graft Engineering，ISHAGE）方案计数CD34+细胞百分率。 ISHAGE方案主要内容包括： (1)使用4个参数：CD34-PE(HPCA-2-PE)、CD45-FITC、SSC\FSC； (2)采用一套累积设门法分析CD34+细胞； (3)获取至少75000个CD45+细胞及100个CD34+细胞； (4)以CD45+白细胞为分母计数CD34+细胞百分率。 二、造血干细胞计数 第一节 造血干细胞的采集与计数 如果需要计数CD34+细胞的绝对数量，只需要在标本中加入已知 数量的荧光微球，按照公式计算CD34+细胞的绝对数 （获取CD34+细胞数/获取微球数）×（每管内微球数/标本体积）。 二、造血干细胞计数 第一节 造血干细胞的采集与计数 第一节 造血干细胞的采集与计数