医学检验教材课件28第五章-第1节- 白细胞功能检验.ppt

第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 第五章 白细胞检验技术 新乡医学院 牛新清 第一节 白细胞功能检验 目 录 一、粒细胞及单核细胞功能检查 二、粒细胞动力学检验 三、淋巴细胞功能检查 第一节 白细胞功能检验 一、粒细胞及单核细胞功能检查 （一）墨汁吞噬试验 【实验原理】 中性粒细胞及单核细胞对细菌、异物等具有吞噬作用。墨汁吞噬试验(ink phagocytosis test)是在一定量的肝素抗凝血中，加入一定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色，镜下观察200个吞噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数。 【参考范围】 1.成熟中性粒细胞吞噬率74%±15%，吞噬指数126±60； 2.成熟单核细胞吞噬率95%±5%，吞噬指数313±86。 第一节 白细胞功能检验 （一）墨汁吞噬试验 【临床意义】 1.急性单核细胞白血病M5a为弱阳性，M5b吞噬指数明显增高； 2.急性粒细胞白血病(M2)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性早 幼粒细胞白血病(M3)的原始及幼稚细胞多无吞噬能力，吞噬试 验为阴性； 3.急性粒-单核细胞白血病(M4)呈阳性反应，慢性粒细胞白血病 (CML)的成熟中性粒细胞吞噬能力明显减低。 【应用评价】该试验方法简单、实用、经济。利用该试验可了解细胞的吞噬能力，从而协助白血病的诊断和鉴别诊断。此法还可以检测吞噬细胞的非特异性吞噬功能。 第一节 白细胞功能检验 【实验原理】 制备白细胞悬液，将待测的中性粒细胞与葡萄球菌混合，37℃温育一定时间后，细菌可被中性粒细胞吞噬。在油镜下观察中性粒细胞吞噬细菌的情况，根据吞噬率和吞噬指数即可反映中性粒细胞的吞噬功能，该试验即细菌吞噬试验。 【参考范围】 1.吞噬率(％)：健康者为62.8%±1.4%。 2.吞噬指数： 健康者为1.06±0.05。 （二）细菌吞噬试验 第一节 白细胞功能检验 【临床意义】 吞噬率和吞噬指数增高，反映中性粒细胞吞噬 异物功能的增强。常见于细菌性感染，对疑有中性 粒细胞吞噬功能低下者，有辅助确诊的价值。 【应用评价】 细菌吞噬试验简单、方便，不需要特殊仪器设 备，可了解中性粒细胞的吞噬功能。 （二）细菌吞噬试验 第一节 白细胞功能检验 【实验原理】 溶菌酶能水解革兰阳性球菌细胞壁中的乙酰氨基多糖成分，使细胞失去细胞壁而破裂。血清溶菌酶活性试验利用对溶菌酶较敏感的微球菌悬液为作用底物，根据微球菌的溶解程度来检测血清或尿中溶菌酶的活性，主要方法有琼脂平板法、比浊测定法及免疫测定法。 【参考范围】 比浊法：11.8±2.2mg/L； 平板法：20.4±2.7 mg/L； 免疫测定法：10～40 mg/L。 第一节 白细胞功能检验 （三）血清溶菌酶活性试验 【临床意义】 1.急性单核细胞白血病的血清和尿液溶菌酶含量明显增高； 2.急性粒-单核细胞白血病血清溶菌酶含量也明显增高； 3.急性粒细胞白血病的血清溶菌酶的含量可正常或增高； 4.急性淋巴细胞白血病多数减低，少数正常； 5.慢性髓细胞白血病血清溶菌酶含量正常，但急变时下降。 【应用评价】 该试验通常用琼脂平板法、比浊测定法检测酶的活性，免疫测定法检测酶的量，两者可以结合分析。免疫测定法具有特异、灵敏、准确及可定量等优点。 （三）血清溶菌酶活性试验 第一节 白细胞功能检验 【实验原理】采用Boyden小室法又称为滤膜小室法。该方法 运用特殊的小盒装置，用一块3~5微米孔径的微孔滤膜将盒分为 上下两个小室，在微孔滤膜的一侧放入粒细胞，另一侧放入趋 化因子(细菌菌体或其产物、补体C3a、淋巴因子等)，检测粒细 胞经滤膜微孔到达趋化因子这一侧的定向移动能力。 【参考范围】 趋化指数3.0～3.5。 【临床意义】 趋化功能降低见于Chediak-Higashi综合征、糖尿病、烧伤、新生儿、慢性皮肤粘膜白色念珠菌感染、高IgE综合征等。 【应用评价】 本试验是体外检测粒细胞和单核-巨噬细胞趋化性强弱的方法。Boyden小室法比琼脂糖法敏感，能检测出纳克（ng）水平的趋化因子活性，且所需时间短、重复性好。 第一节 白细胞功能检验 （四）趋化功能试验 【实验原理】 硝基四氮唑蓝(NBT)是一种染料，其水溶液呈淡 黄色。中性粒细胞杀菌过程中能量消耗增多，耗氧量也增加， 细胞内磷酸己糖旁路代谢增强。NBT被吞入或渗入中性粒细胞 后，可接受葡萄糖-6-磷酸在已糖磷酸旁路代谢中NADPH氧化脱 下的氢，而被还原成非水溶性的蓝黑色颗粒沉着在胞质内，可 在显微镜下观察并计数阳性