医学检验教材课件32第七章-第1节-血管壁和血管内皮细胞的检验.pptVIP

单击此处编辑母版标题样式 第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 第七章 血栓与止血疾病检验技术 第一节 血管壁和血管内皮细胞 的检验 哈尔滨医科大学大庆校区 高春艳 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 一、出血时间检测? 二、血管性血友病因子检测 三、血浆内皮素-1检测 四、血浆血栓调节蛋白检测 五、血浆6-酮-前列腺素F1α和 去甲基6-酮-前列腺素F1α 检测 目 录 重点提示 血管壁和血管内皮细胞检验方法 vWF的检测及其诊断血管性血友病的意义 PT、APTT、TT检测的临床意义 血栓弹力图仪的原理、主要检测参数及临床意义 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 一、出血时间检测 【实验原理】 出血时间（bleeding time, BT）是指皮肤受特定 条件的外伤后，出血自行停 止所需的时间。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 【参考区间】模板法：6.9±2.1分钟 【临床意义】 1.BT延长 见于血管壁和血小板的初期止血缺陷。 2.BT缩短 见于某些严重的血栓前状态和血栓性疾病。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 一、出血时间检测 【应用评价】 ⒈ BT是筛查血管与血小板相互作用有无异常较为 敏感的试验。 ⒉ BT实验操作较为复杂、皮肤切口稍大，临床开 展受到一定限制，一般不作为常规筛查试验。 ⒊ 试验前一周应停用抗血小板药物。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 一、出血时间检测 二、血管性血友病因子 血管性血友病因子（von Willebrand factor, vWF）是一种多聚体大分子蛋白，具有与胶原、肝素、FⅧ轻链、血小板膜糖蛋白GPIb及GPⅡb-Ⅲa、瑞斯托霉素等结合的多个功能区。 vWF的分析包括含量、活性、功能、多聚体等多项检测。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 （一）血浆vWF抗原（vWF：Ag）含量 （二）血浆vWF活性（vWF：activity，vWF：A） （三）vWF的功能分析 （四）vWF多聚体分析 （五）基因诊断 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 （一）血浆vWF抗原（vWF：Ag）含量 【实验原理】胶乳颗粒增强的免疫比浊法。在待测血浆中加入包被有抗vWF：Ag单克隆抗体的胶乳颗粒，后者与vWF：Ag结合后发生凝集反应，胶乳颗粒凝集的强度与血浆中的vWF：Ag含量成比例关系，通过全自动凝血分析仪可以快速测定血浆vWF：Ag的含量，结果以对照血浆的百分比表示。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 （二）血浆vWF活性（vWF：activity，vWF：A） 【实验原理】用抗vWF的血小板结合位点的单克隆抗体包被的胶乳颗粒与待测血浆中的vWF反应，胶乳颗粒发生凝集的程度与vWF活性成比例关系。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 （三）vWF的功能分析 1.血浆vWF瑞斯托霉素辅因子检测 ：比浊法。 2.瑞斯托霉素诱导的血小板凝集试验 ：血小板聚集仪法。 3.vWF的胶原结合能力：ELISA定量检测与胶原结合的vWF。 4.vWF的FⅧ结合能力：用抗vWF的单克隆抗体包被酶标反应板，加入去除FⅧ的待测血浆，形成抗vWF-vWF的复合物，再加入一定浓度的重组FⅧ，然后通过ELISA定量vWF结合的FⅧ量，结果以对照血浆的百分比表示。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 （四）vWF多聚体分析 【实验原理】用SDS琼脂糖凝胶电泳检测vWF的功能 多聚体，然后通过放射自显影或Western blotting鉴定和分析各种多聚体区带。 （五）基因诊断 【实验原理】常用PCR和突变分析检测vWF的基因缺陷。 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 【参考区间】 （1）血浆vWF:Ag(血凝分析仪检测) ： 41.1%～125.9%(O型)；61.3%～157.8%(A+B+AB型) （2）血浆vWF:A(血凝分析仪检测) ： 38.0%～125.2%(O型)；49.2%～169.7%(A+B+AB型) （3）血浆vWF:Rc:70%～150%； vWF:CBc: ; vWF:FⅧ BC： RIPA：0.5g/L，Ris＜20%；1.5g/L Ris＞60% 第一节 血管壁和血管内皮细胞的检验 二、血管性血友病因子 【临床意义】 （1）遗传性或获得性血管性血友病