医学检验教材课件36第七章-第5节-抗凝系统检验.ppt

【应用评价】 甲苯胺蓝和硫酸鱼精蛋白均可以中和肝素，因此两者均可用于TT延长的纠正试验。本试验不需特殊仪器设备，操作简便快捷，是检测患者血浆中肝素类物质是否增多的常用试验，在基层单位也易于开展。机体类肝素物质增多的病理状态下，常伴有高水平FDP及异常纤维蛋白原增多，会影响本试验的敏感性，建议与正常血浆、硫酸鱼精蛋白等纠正试验同时检测。 第五节 抗凝系统检验 二、病理性抗凝物质 血浆狼疮抗凝物 【实验原理】一般采用改良的Russell蛇毒时间(Russell viper venom time， RVVT)进行狼疮抗凝物(lupus anticoagulation， LAC)检测，包含以下几个部分： LAC筛查试验(LAC Screen) 用蛇毒试剂激活待测血浆中的FⅩ，加入Ca2+和低浓度磷脂，观察血浆发生凝固的时间，称为RVVT。若RVVT明显延长时，提示有凝血因子缺陷或存在LAC。加入正常血浆后，延长的RVVT缩短，为凝血因子缺陷；若RVVT仍延长，表明存在LAC。 第五节 抗凝系统检验 二、病理性抗凝物质 LAC确认试验(LAC confirm) 加入高浓度的磷脂中和LAC后，延长的RVVT缩短或恢复正常，可确证血浆中存在LAC。 比值计算 通过分别计算LAC Screen或 LAC Confirm与正常对照血浆RVVT的比值，得到LAC筛查试验比值(screen ratio，SR)和确认试验比值(confirm ratio，CR)，用筛查比值除以确认比值，得到标准化LAC比值(normalized LAC ratio，NLR)，根据NLR的大小，判断待测血浆中有无LAC。 第五节 抗凝系统检验 二、病理性抗凝物质 第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 第七章 血栓与止血疾病检验技术 哈尔滨医科大学大庆校区 高春艳 第五节 抗凝系统检验 目 录 一、生理性抗凝物 二、病理性抗凝物 三、血浆肝素及类肝素物质检测 重点提示 生理性抗凝蛋白 抗凝血酶 蛋白C系统 病理性抗凝物 狼疮抗凝物 凝血因子抑制物 第五节 抗凝系统检验 一、生理性抗凝蛋白 抗凝血酶（AT）检测 【实验原理】 抗凝血酶活性（ AT:A ）：在待测血浆中加入肝素(heparin, Hep)和过量的FⅩa，血浆中的AT与FⅩa形成无活性复合物，剩余的FⅩa水解显色肽S-2765并释放发色基团对硝基苯胺（pNA），pNA在405nm波长有最大吸收峰，其显色程度与待测血浆中AT:A呈负相关。 抗凝血酶抗原（ AT:Ag ）：可用双抗体夹心法ELISA、免疫比浊法或免疫火箭电泳均可测定血浆AT:Ag的含量。 第五节 抗凝系统检验 【参考区间】血浆AT:A 80%～120%； AT:Ag 0.17～0.41g/L(免疫火箭电泳) AT:A检测原理图（发色底物法，405nm） 释放后显示黄色 405nm 酶切部位 COOH H2N 合成底物 天然底物 pNA (对硝基苯胺) NO2 NH2 pNA 第五节 抗凝系统检验 一、生理性抗凝蛋白 【临床意义】 1. 当AT缺陷时，患者易出现血液高凝状态而形成血栓。根据病因可分为遗传性和获得性两类。 （1）遗传性AT缺陷：可以分为两型，I型患者AT活性及抗原性均减低；II型患者AT抗原正常但活性减低。I型患者血浆中AT的活性和抗原性为正常人的50%左右，II型患者其AT结构与功能异常的类型较多，其共同表现是对肝素的亲和力降低，在抗凝治疗中，若出现肝素治疗无效，应注意检查有无AT缺乏。 第五节 抗凝系统检验 一、生理性抗凝蛋白 （2）获得性AT缺乏：包括AT的合成降低、丢失增加、消耗增加三种类型。①合成降低主要见于进行性肝实质损伤，如肝硬化、重症肝炎、肝癌晚期，常与疾病严重程度相关；②丢失增加见于肾病综合征，AT随尿蛋白排泄而丢失而减少；③消耗增加见于血栓前期和血栓性疾病，心脑血管疾病、DIC、脓毒血症、先兆子痫时，AT因消耗增多而减少，故AT减少可作为DIC的诊断与监测指标之一。大型外科手术、烧伤也可使AT短时间下降，可能诱发血栓形成或DIC；④新生儿；⑤ 某些药物影响。 第五节 抗凝系统检验 一、生理性抗凝蛋白 2. AT水平升高，可见于血友病、白血病和再障的急性出血期，口服抗凝剂及黄体酮治疗过程中。 【应用评价】 AT:A测定中用FⅩa替代过去方法中的凝血酶，可以减少干扰和增加结果的稳定性。AT:A和AT:Ag同时测定，有助于AT缺陷症分型。 第五节 抗凝系统检验 一、生理性抗凝蛋白 凝血酶-抗凝血酶复合物检测 【实验原理】