医学检验教材课件37第七章-第6节-纤溶活性检验.pptVIP

第一章 造血及造血调控 第一节 造血器官与造血微环境 临床血液学检验技术 第七章 血栓与止血疾病检验技术 哈尔滨医科大学大庆校区 高春艳 第六节 纤溶活性检验 目 录 一、纤溶有关组分检测 二、纤溶降解产物检测 三、纤溶抑制物检测 重点提示 纤溶酶原 组织型纤溶酶原活化剂 纤溶酶原活化抑制剂 α2-抗纤溶酶 纤溶酶-抗纤溶酶复合物 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 血浆纤溶酶原活性及抗原测定 【实验原理】 1.纤溶酶原活性(PLG:A)：在纤维蛋白原存在的条件下，待测血浆中的PLG与过量的链激酶(streptokinase，SK)结合，生成的PLG-SK复合物水解发色底物S-2403，释放出黄色的pNA，在405nm波长下动态监测pNA的吸光度，可计算出血浆PLG:A。其颜色的深浅与PLG:A正相关。 第六节 纤溶活性检验 纤溶酶原抗原(PLG:Ag)：用两种不同的抗纤溶酶原抗体分别作为包被抗体和酶标抗体，常用双抗体夹心ELISA定量检测血浆中的PLG:Ag。 发色底物法检测PLG:A的原理示意图 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 【参考区间】血浆PLG:A 73%～127%（发色底物法），血浆PLG:Ag 0.16～0.28 g/L。（ELISA） 【临床意义】 1. 减低：提示纤溶活性增高，根据病因可分为遗传性和获得性两类： （1）遗传性PLG减低：根据活性和抗原性的检测结果分为异常纤溶酶原血症(dysplasminogenemia)与遗传性PLG缺乏；前者PLG含量一般正常，但活性减低，杂合子型为40%～60%，纯合子型可＜5%；后者极少见，其含量和活性均显著减低。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 （2）获得性PLG减低：可因合成减少（如肝硬化等，其活性和含量均减低。）或消耗增加（DIC、脓毒血症、溶栓治疗、原发性纤溶亢进时，因纤溶活性增高所致）导致。 2.增高：提示纤溶活性减低，见于血栓前状态和血栓性疾病。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 【应用评价】 1.发色底物法测定PLG:A比免疫化学法更简便、快速。除少数患者外，PLG:A与抗原测定结果的相关性较好。 2.血浆PLG水平可因多种因素的影响而出现波动，消耗或合成减少均可导致血浆PLG减低，对纤溶亢进的反映不够灵敏，血浆PLG的抑制物α2-抗纤溶酶比其更敏感。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 血浆组织型纤溶酶原活化剂活性及抗原检测 【实验原理】 1.组织型纤溶酶原活化剂活性( t-PA:A)：血浆优球蛋白中含有t-PA，加入过量纤溶酶原和纤维蛋白共价物，t-PA可吸附于纤维蛋白上，使纤溶酶原转变为纤溶酶，纤溶酶水解发色底物(S-2251)并释放出黄色的对硝基苯胺(pNA)，颜色的深浅与t-PA:A呈正相关，在405nm波长下测定pNA的吸光度，可计算出血浆t-PA:A。 2. 组织型纤溶酶原活化剂抗原(t-PA:Ag)：常用双抗体夹心ELISA定量检测血浆中的t-PA:Ag。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 【参考区间】血浆t-PA:A 0.3～0.6活化单位/ml(发色底物法)； 血浆t-PA:Ag1.5～10.5μg/L（ELISA）。 【临床意义】 1.增高 （1）提示纤溶活性增强，见于原发性与继发性纤溶亢进症，如DIC等。 （2）溶栓治疗监测：静脉注射t-PA 10～20min后，血浆t-PA:A 或t-PA:Ag达到参考范围上限的2～3倍时可取得较好疗效。 2.减低 （1）提示纤溶活性减低，见于高凝状态、血栓前状态与血栓性疾病， 如深静脉血栓形成、动脉血栓形成、缺血性脑梗死等。 （2）也可见于高脂血症、手术损伤及口服避孕药等。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 【应用评价】血浆t-PA的影响因素较多，在剧烈运动、应激反应时均可增高，并可随年龄的增长而升高。此外，血液标本的采集、标本状态、血浆中的其他抗体等也可影响t-PA:Ag的测定结果。t-PA的测定方法较多，但未能达到标准化，不同实验室的报告方式与参考范围明显不同，各实验室应根据所使用方法建立自己的参考范围。 第六节 纤溶活性检验 一、纤溶有关组分检测 血浆纤溶酶原活化抑制物活性及浓度测定 【实验原理】 纤溶酶原活化抑制物活性(PAI:A)：在待测血浆中加入过量的t-PA和PLG，部分t-PA与血浆中的PAI 生成1:1无活性t-PA:PAI复合物，剩余的t-PA激活PLG成为PL，PL水解发色底物(S-2251