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陶传敏 三、微生物学检验 (三)报告及解释 血液中HDV抗原阳性主要见于急性HDV早期。在慢性HDV感染中,HDV抗原可呈波动性反复阳性。在急性HDV感染时,抗HDV IgM是首先检出的抗体,尤其是联合感染时往往是唯一可检出的标志物。在慢性HDV感染中,HDV总抗体持续保持高滴度,即使感染终止后仍可存在数年。HDV RNA是HDV存在及复制的一个有用指标 第五节 戊型肝炎病毒 戊型肝炎病毒的生物学特性及传播途径 戊型肝炎病毒的微生物学检验 标本的采集 检验方法 报告及解释 重点提示 一、临床意义 戊型肝炎病毒属于肝炎病毒科(Hepeviridae)肝炎病毒属(Hepevirus) HEV主要通过肠道传播,易通过污染水源而导致暴发流行,其传播具明显季节性,多发生于雨季或洪水后。主要侵犯青壮年,表现为重型肝炎的比例较高。潜伏期约2~9周,感染后主要为临床显性感染及隐性感染两类。该病为自限性疾病,发病后6周可自然康复。一旦病愈,获终生免疫 二、生物学特性 HEV为二十面体球形颗粒,直径27~34nm,无包膜,表面有锯齿状突起,形似杯状。HEV有空心和实心两种颗粒,实心颗粒内部致密,是完整的HEV结构;空心颗粒内部含电荷透亮区,为缺陷的、含不完整HEV基因的病毒颗粒 (1)HBsAg和抗HBs HBsAg是HBV感染后第一个出现的标志物,是诊断的重要指标。急性肝炎恢复后, HBsAg一般在1~4个月内消失,持续6个月以上则认为转为慢性肝炎。无症状携带者指肝功能正常的乙肝患者,虽肝组织已有病变,但无临床症状。在急性感染恢复期可检出抗HBs,一般是在HBsAg从血清消失后发生抗HBs阳转。抗HBs是中和抗体,是乙肝康复的重要标志,可持续数年。抗HBs出现是HBsAg疫苗免疫成功的标志 (2)HBeAg和抗HBe HBeAg是一种可溶性抗原,是HBV复制及传染性强的指标,在潜伏期与HBsAg同时或在HBsAg出现稍后数天就可在血液中检出。HBeAg持续存在时间一般不超过10周,如超过10周则提示转为慢性化。抗HBe出现于HBeAg阴转后,比抗HBs晚但消失早,其阳性表示HBV复制水平低,传染性下降,病变趋于静止(但有前C区突变者例外) (3)HBcAg和抗HBc HBcAg存在于病毒核心部分以及受染的肝细胞核内,是HBV存在和复制活跃的直接指标。HBcAg抗原性强,在感染早期即可刺激机体产生抗HBc,较抗HBs出现早得多,早期以IgM为主,随后产生IgG型抗体。抗HBc IgM阳性多见于乙型肝炎急性期,但慢性乙肝患者也可持续低效价阳性,尤其是病变活动时;HBc总抗体主要是抗HBc IgG,只要感染过HBV,无论病毒是否被清除,此抗体均为阳性,可持续存在数年 3.核酸检测 可用定性PCR法、荧光定量PCR法和核酸杂交法检测。HBV DNA定性和定量检测反映病毒复制情况或水平,主要用于慢性感染的诊断、血清DNA及其水平的监测以及抗病毒疗效。核酸杂交技术直接检测血清中DNA。目前最常用的方法是定性PCR法和实时荧光定量PCR法 4.HBV基因型 目前HBV基因型主要使用S区基因测序或反转录酶(RT)区基因测序的方法。常用的方法有:①基因型特异性引物PCR法;②限制性片段长度多态性(RFLP)分析法;③线性探针反向杂交法(INNO-LiPA);④PCR微量板核酸杂交酶联免疫法;⑤基因序列测定法等 5.HBV耐药突变位点检测和YMDD突变的检测 (1)HBV耐药突变位点检测 主要使用P基因区的RT区基因测序方法,用来预测核苷类药物耐药情况,如拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、替诺福韦酯和替比夫定等 (2)YMDD突变的检测 P基因区存在基因变异(如YMDD、YIDD及YVDD变异等),采用溶解曲线方法进行检测,可预测拉米夫定耐药 (三)报告及解释 1.免疫学检测 HBV免疫学标志与临床关系较为复杂,必须对几项指标综合分析,可估计感染阶段及临床疾病预后。对于临床治疗监测可用HBsAg定量检测和HBeAg血清学转换 HBV抗原、抗体检测结果的临床分析 HBsAg 抗HBs HBeAg 抗HBe 抗HBc 临床意义 + - + - - 潜伏期或急性乙肝早期 + - + - + 急性或慢性乙肝,传染性强(“大三阳”) + - - + + 乙肝后期或慢性乙肝,复制水平低(“小三阳”) - + - + + 乙肝康复,有免疫力 - + - + - 乙肝康复,有免疫力 - + - - - 乙肝康复或接种过疫苗,有免疫力 - - - - - 未感染过HBV,为易感者 (三)报告及解释 2.核酸检测 反映病毒复制情况或水平,可用于评价疾病活动度,筛查抗病毒治疗对象,判断治疗效果,优化抗病毒治疗,启动抗病毒治疗时的监测等。但DNA阳性及其拷贝数与肝脏病理损害程度不相关
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