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第三章 病毒感染的诊断与防治;常用的病毒学诊断方法包括:
病毒的分离鉴定
病毒的血清学检查
病毒蛋白和核酸的检测;一、标本的采取与送检;二、病毒的分离与鉴定;2.鸡胚培养
鸡胚对多种病毒敏感。一般采用孵化9~14天的鸡胚,根据病毒种类不同,将病毒标本 接种于鸡胚的不同部位,最常用的鸡胚接种部位有:羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等。
;;;9、我们的市场行为主要的导向因素,第一个是市场需求的导向,第二个是技术进步的导向,第三大导向是竞争对手的行为导向。七月-21七月-21Sunday, July 18, 2021
10、市场销售中最重要的字就是“问”。12:58:4612:58:4612:587/18/2021 12:58:46 PM
11、现今,每个人都在谈论着创意,坦白讲,我害怕我们会假创意之名犯下一切过失。七月-2112:58:4612:58Jul-2118-Jul-21
12、在购买时,你可以用任何语言;但在销售时,你必须使用购买者的语言。12:58:4612:58:4612:58Sunday, July 18, 2021
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇,谁就心想事成。七月-21七月-2112:58:4612:58:46July 18, 2021
14、市场营销观念:目标市场,顾客需求,协调市场营销,通过满足消费者需求来创造利润。18 七月 202112:58:46 下午12:58:46七月-21
15、我就像一个厨师,喜欢品尝食物。如果不好吃,我就不要它。七月 2112:58 下午七月-2112:58July 18, 2021
16、我总是站在顾客的角度看待即将推出的产品或服务,因为我就是顾客。2021/7/18 12:58:4612:58:4618 July 2021
17、利人为利已的根基,市场营销上老是为自己着想,而不顾及到他人,他人也不会顾及你。12:58:46 下午12:58 下午12:58:46七月-21
;3.组织培养法 (tissueculture) 或细胞培养 (cellculture)法
是将离体活组织块或分散的组织细胞加以培养的技术总称,为病毒分离鉴定中的最常用的基本方法。
;; 细胞的变化
有些病毒在细胞内增殖时可引起特有的细胞病变,称为细胞病变效应 (CPE)。常见的变化有细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等。
有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等 作用于细胞膜,可使邻近的细胞相互融合,形成多核巨细胞或称融合细胞。
有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培养细胞中形成胞浆或核内的包涵体。 ;;病毒培养时出现的CPE;2.红细胞吸附 (hemadsorption,HAd)
流感或副流感病毒等感染细胞后,由于细胞膜上出现了血凝素(haemagglutinin,HA),具有吸附脊椎动物 (豚鼠、鸡、猴等) 红细胞的能力,这一现象称红细胞吸附,常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖。若有相应的抗血清,则能中和细胞膜上的HA,HAd不再发生,称红细胞吸附抑制试验。;3.干扰现象(interference)
某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化(如HAd),但能干扰在其后感染的另一病毒的增殖。如风疹病毒感染Vero细胞时CPE不明显,但它能干扰后感染的埃可病毒 (ECHOV) 的增殖,从而阻抑后者所特有的CPE。 ;4.细胞代谢的改变
病毒感染细胞的结果可使培养液的pH值改变,说明细胞的代谢在病毒感染后发生了变化。这种培养环境的生化改变也可作为判断病毒增殖的指标。;(二) 病毒的数量与感染性测定 ;2.50%组织细胞感染量 (TCID50)测定法
该方法是测定病毒能使50%的组织培养细胞发生感染的最小量。一般是将病毒悬液作10倍的系列稀释,分别接种细胞,经一定时间后观察CPE、血细胞吸附等指标,以最高稀释度能感染50%细胞的量为终点。最后用统计方法计算出50%组织细胞感染量( 50%tissue culture infectious dose,TCID50)。;三、病毒感染的血清学诊断;1.中和试验(neutralizing test,NT test);2.补体结合试验 (complement fixation test,CF test);3.血凝抑制试验(hemagglutinatia inhibition test, HI test) ;
病毒 +鸡RBC = 凝集(血凝试验)
病毒 +特异性抗体 +鸡RBC=不凝集
(血凝抑制试验);四、病毒感染的快速诊断;(一) 形态学检查;(二)病毒蛋白抗原检查
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