超声波辅助_反相HPLC法测定郑州市火棘果中的有机酸_高向阳.pdfVIP

第27 卷 第7 期 河 南 科 学 Vol.27 No.7 2009 年7 月 HENAN SCIENCE Jul. 2009 文章编号：1004-3918 （2009）07-0821-03 超声波辅助－反相HPLC 法测定 郑州市火棘果中的有机酸 高向阳，刘 娜 （河南农业大学食品科学技术学院，郑州 450002） 摘 要：用高效液相色谱法对郑州地区火棘果中有机酸的种类及含量进行了测定. 色谱柱为 HypersilODS C18 （4．6 mm ×250 mm ，5 μm）；流动相：磷酸二氢钠－磷酸缓冲液（pH 2．6）；流速：0．8 mL /min ；检测波长：210 nm . 实验 结果表明：火棘果果实中主要含柠檬酸9．243 mg/kg ，苹果酸10．244 mg/kg ，琥珀酸7．215 mg/kg ；在0．1～200．0 μg/mL 范围内，线性关系良好，相关系数分别为0．999 9 ，0．999 9 ，0．999 8 ；最低检测限为0．01～0．04 μg/mL . 本法简便、准确、 快捷，用于郑州地区火棘果中有机酸的测定，为火棘资源的质量检测与开发利用提供了科学依据. 关键词：火棘果；高效液相色谱法（HPLC）；有机酸；超声波提取 中图分类号：TS 207．3 文献标识码：A 1 材料与方法 1．1 主要仪器与试剂 Waters 515 、二元泵、2487 紫外可见检测器、Empower 工作站（美国Waters）、SKF－12 超声波清洗器（上海 科导超声仪器有限公司）、超纯水设备（美国 Millipore）等. 柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、磷酸二氢钠、磷酸均为分析纯试剂，所用水为超纯水. 1．2 原料 郑州市区的成熟火棘果，颗粒红色，外观鲜亮，味酸微甜. 1．3 实验方法 1．3．1 色谱条件 色谱柱：HypersilODS C18 （4．6 mm ×250 mm ，5 μm）（大连依利特）；流动相：磷酸二氢钠－磷 酸缓冲液（pH 2．6）；流速：0．8 mL/min ；检测波长：210 nm ；柱温：25 ℃ ；进样量：25 μL . 1．3．2 标准溶液的制备 分别准确称取苹果酸、琥珀酸、柠檬酸分析纯试剂各0．010 0 g，放入小烧杯中混合， 用超纯水5 mL 溶解，并定容于10 mL 容量瓶中. 该混合标准溶液中各有机酸质量浓度分别为1 000 μg/mL ， 作为标准储备液，用前以超纯水稀释. 1．3．3 样品处理及测定 将新采集的火棘果样品洗净，室温条件下晾干表面水分，准确称取1．000 g 用研钵 研成浆状，用40 mL 超纯水将研钵内和钵锤上的样品分数次洗涤，定量移入小烧杯中，超声提取45 min ，过 [1] 滤后用纯水定容于50 mL 容量瓶中，进样前过0．45 μm 滤膜 . 用外标法与标准溶液同时按1．3．1 项色谱条 件进行对照测定. 2 结果与讨论 2．1 超声波功率 所用超声波清洗器的额定功率为500 W . 2．2 提取方法的选择 分别用纯水、甲醇、乙腈对火棘果中水溶性有机酸进行提取效率实验，结果表明水为最佳提取溶剂. 2．3 最佳超声时间的确定 准确称取1．000 g 样品6 份，分别用研钵研成浆状，用40 mL 超纯水将研钵中和钵锤上的样品分数次洗 收稿日期：2009-04-07 基金项目：河南省重点学科建设基金资助（10466－X－082301） 1949－），男，河南唐河人，教授，主要从事食品分析、天然资源研究与开发等方面的教学和研究工作. 作者简介：高向阳（ - 822 - 河 南 科 学 第第第第第第第第第第第第第第第第27272727272727272727272727272727 卷卷卷卷卷卷卷卷卷卷卷卷卷