基因工程体外重组(带动画).pptxVIP

第六章 DNA重组的操作;外源DNA;;第一节 DNA的体外重组;;;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;第一节 重组DNA分子的构建;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;;;1. 粘性末端连接 （1）两端具有相同粘末端的DNA分子之间的连接 （2）两端具有不同粘性末端的DNA分子之间的连接 2. 平头末端连接 （1）直接连接 （2）人工加尾形成 “粘性末端” a)同聚加尾法 b)衔接物连接 c) DNA接头连接法 3. PCR产物的连接 （1）在引物的5’端设计酶切位点 （2）与T载体直接连接;;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;第一节 DNA的体外重组;　 　　3. 防止载体自身环化连接 　（1）提高插入片断的用量 　　　　连接反应体系中，插入片断比载体多10倍以上。 　（2）用碱性磷酸酶处理载体 　　　载体切口的5’磷酸被除去，不能自我连接。;三、载体和外源DNA插入片段的连接结果;;;