实验四 浮游植物采集和定量;一、实验目的:;二、实验原理:;三、实验仪器、用品;调查工具;2. 浮游生物网;3、透明度盘
4、广口瓶(标本瓶);
4.浮游植物定量:;5.浮游动物定量:;四、实验内容 :;定量样的采集;四、实验内容 :;四、实验内容 :;将样品倒入量筒中沉淀浓缩;4. 浮游植物定性:浮游植物样品采集参照文献( 国家环保总局,2002 )的方法。定性样品用孔径约0.064 mm的25号浮游生物网在水面下约0.5 m处以适当的速度作“∞”字形来回拖动1~3 min,获得的浓缩样分为两份,一份立即用适量的鲁哥氏液固定,另一份活体样品于24小时内镜检。;5. 计数:计数一定体积内的浮游植物种类和数量;行格法按照计数玻片上的格子确定技术范围,
玻片样品池长x宽=20mmx20mm,即每列长x宽=20mmx2mm
计数水样体积=0.001mlx计数格数;镜头法需量测量镜头的直径d,实验室目前常用的镜头的视野直径:
d1=2000um(10x),1000um(20x),500um(40x)
d2=1800um(10x),900um(20x),450um(40x)
镜头面积=πr2。
;使用的工具有: 100μl移液枪(带有0.1毫升刻度的小吸管),容量为0.1毫升的计数框(面积20ⅹ20毫米2)和具有移动台的显微镜。
用前可浸入70%的酒精中,用时取出,用细绢拭净,计数框用前以薄绸布拭净,用毕以水弄湿后轻拭或用水冲净。;取样计数时应注意以下方面:
将浓缩沉淀后水样充分摇匀(倒转摇)后,立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品,注入0.1ml计数框内,小心盖上盖玻片(20×20㎜2),在盖盖玻片时,要求计数框内没有气泡,样品不溢出计数框。然后在显微镜下计数。
在400-600倍的显微镜下观察计数,每个水样标本计数两次(二片),取其平均值,一每片计数100个视野,但具体观察的视野数以样品中浮游植物多少而酌情增减,如果平均每个视野有十几个时,数50个视野就够了,如果平均每个视野有5-6个时,就需数100个视野;如果平均每个视野不超过1-2个时,要数200个视野以上。;取样计数时应注意以下方面:
每瓶标本计数两片取其平均值。同一样品的两片计算结果和平均数之差应不大于其均数的±15%时,其均数视为有效结果,否则还必须测第三片,直至三片平均数与相近两数之差不超过均???的15%为止。
在计数过程中,常碰到某些个体一部分在视野中,另一部分在视野外,这时可规定出在视野上半圈者计数,出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示,对不宜用细胞数表示的群体或丝状体,应分细胞大小分类计数。
计数时记录保持整洁清晰,便于整理计算。应明确记录采样时间、地点、原水样体积、浓缩体积、计数片数和视野数。
;数横条,最少不少于3条具体可自行掌握。
总之不论数视野还是数横条,每片计数到的浮游植物总数应达到200个(低浓度时)-500个(高浓度时)以上。
;同一样品的二片计数结果与其均数之差距如果不大于其均数的±15%,这两个相近的值的均数即可视为计数结果。
例:计数第一个片为250个,计数第二片为246个
则两片的均数为(250+246)/2=248
均数与第一片之差:248-250= -2
均数与第二片之差:248-246=2
则:-2/248= -0.0081即 -0.81%
2/248=+0.0081 即 0.81%
因为0.81%10%,所以上述相近值的均数应视为计数结果。;计算细胞密度的公式:
N=(A/Ac)×(Vs/V)×n
式中,N为每升(L)原水样中浮游植物数量;
A为计数框的面积(mm2)(1 mm2 );
Ac为计数面积(mm2);
Vs为1L原水样浓缩后的样品体积(ml);
V为计数框的体积(ml)(0.1 ml );
n为计数所得浮游植物数目。;选择采样水体
及采样点;作业:1.列表表示各种类浮游植物的数量及数量占总量的百分比。;思考题 :
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