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DNA复制的条件
1. 底物
2. 模板
3. 引发体和RNA引物
4. DNA聚合酶
5. DNA连接酶
6. 单链DNA结合蛋白
7. 解旋酶
8. 拓扑异构酶; ■ 噬菌体DNA按滚环方式复制
■线粒体DNA按D环方式复制
引起突变的因素:自发因素、物理因素、化学因素。
同义突变;误义突变;无义突变;移码突变;DNA损伤的修复 ;第17章;在生物界,RNA合成有两种方式:;转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 ;复制和转录的区别;原核生物转录的模板和酶
Templates Enzymes in Prokaryotic Transcription;一、原核生物转录的模板;5???···GCAGTACATGTC ···3′;;二、RNA合成由RNA聚合酶催化;;(二)RNA聚合酶由多个亚基组成;核心酶
(core enzyme);三、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上起动转录;;RNA聚合酶保护法;;原核生物的转录过程
The Process of Transcription in Prokaryote;RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。
DNA双链解开,使其中的一条链作为转录的模板。;E.coli的转录起始和延长 ;2. DNA双链局部解开,形成开放转录复合体(open transcription complex) ;;;二、 原核生物的转录延长时蛋白质的翻译也同时进行;转录空泡(transcription bubble):;;依赖Rho 因子的转录终止
非依赖Rho因子的转录终止;ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质,亚基分子量46kD。
ρ因子能结合RNA,又以对poly C的结合力最强。
ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。
;ρ因子的作用原理:;;(二) 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;茎环结构使转录终止的机理:;真核生物的转录过程
The Process of Transcription in Eukaryote;;一、 真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶;真核生物的RNA聚合酶;;二、转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与;;;;;(二) 转录因子;参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ;;Ⅱ型基因中的四类转录因子 ;(三) 转录起始前复合物;PIC的形成;(四)少数几个反式作用因子的搭配启动特定基因的转录;三 、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象;;四、真核生物的转录终止和加尾修饰同时进行;真核生物RNA的加工
Post-transcriptional Modification of Eukaryotic RNA;;几种主要的修饰方式:;一、真核生物mRNA的加工包括首、尾修饰和剪接;帽子结构:;5? pppGp…;帽子结构的意义:;(二)前体mRNA在3’端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 ;;;真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;3. 内含子的分类 ;4. mRNA的剪接;②;pG-OH
(ppG-OH, pppG-OH);真核生物前体mRNA经剪切(cleavage)和剪接(splicing)两种模式可加工成不同的mRNA;许多真核生物基因转录后有一个对mRNA外显子加工的过程,可通过特定碱基的插入、缺失或置换,使mRNA序列中出现移码突变、错义突变或无义突变,导致mRNA与其DNA模板序列不匹配,使同一前体mRNA翻译出序列、功能不同的蛋白质。这种基因表达的调节方式称为mRNA编辑(mRNA editing)。 ;? RNA编辑作用说明,基因的编码序列经过转录后加工,是可有多用途分化的,因此也称为分化加工(differential RNA processing)。;rRNA的转录后加工;tRNA的转录后加工;;;碱基修饰;四、核 酶;核酶研究的意义;RNA生物合成的特点; RNA合成需要RNA聚合酶。E.coli细胞中约有RNA聚合酶分子3000个。此酶催化RNA主链中核苷酸间的3’,5’磷酸二酯键的形成,催化反应速度很快,在37℃时RNA链的延伸可达50~90个核苷酸/秒。
RNA的合成是以DNA为模板合成核糖核苷酸链的过程,故称为转录(transcription)。
RNA的合成非常精确,转录没有
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