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生物选修 3 知识体系 专题 1 基因工程 知识系统表解 【专题总系统】 【专题分系统】 1.1 DNA 重组技术的基本工具 来源 主要从原核生物中分离纯化出来。 种类 已从近 300 种不同的微生物中分离出约 4000 种限制酶。 识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列 （大多数识别序列 限制性 内容 由 6 个核苷酸组成， 如 EcoRI 、SmaI；也有少数识别序列由 4、 核酸内 及 5 或 8 个核苷酸组成） ，并使每一条链中特定部位的两个核苷 切酶― 作 特点 酸之间的磷酸二酯键断开，参见教材图 1-2 ，即具有特异性。 “分子 DNA 切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式（参见教材图 手术刀” 用 重组 1-3 ）： 结果 技术 ①黏性末端：在识别序列中轴线两侧切开 的基 ②平末端：在识别序列中心轴线处切开 本工 将双链 DNA 片段“缝合” 起来， 恢复被限制酶切开的两个核 作用 具 苷酸之间的磷酸二酯键。 DNA 连 种类 来源 作用 接酶― 大 肠 杆 只能连接互补的黏性末端。 “分子 E ·coli DNA 连接酶 种类 菌 缝合针” T 4 噬 菌 连接互补的黏性末端和平末 T DNA 连接酶 4 体 端（效率低）。 基因进入 举例 质粒 概 是一种裸露的、 结构简单、 独立于细菌染色体 受体细胞 （常 念 （即拟核 DNA ）之外，并具有自我复制能力 的载体― 用） 的双链环状 DNA 分子。 “分子运 ●具有一个至多个限制酶切点，供外源 DNA 输车” 片段插入其中； 特 ●可在受体细胞中自我复制或整合到染色体 点 DNA 上进行同步复制； ●具有标记基