普通生物化学06第六章生物氧化.pptx

第六章 生物氧化;一、生物氧化概述;（二）生物氧化的特点;然而生物氧化仍不失其特点：;（三）生物氧化的类型;1、不需传递体的生物氧化体系（一酶体系）;2、需要传递体的生物氧化体系（二酶及多酶体系）;（四）生物氧化中的氧化反应类型;(五）生物氧化的部位;二、生物氧化中CO2的生成;(一）直接脱羧; 2、β-直接脱羧 从β- 碳原子上非氧化地脱去羧基的反应，如三羧酸循环中草酰琥珀酸的脱羧作用：;（二）氧化脱羧; 2、β-氧化脱羧 如苹果酸在苹果酸酶的作用下，脱氢氧化并脱羧生成丙酮酸的反应：;三、生物氧化中水的生成;2、呼吸链的种类;（二）呼吸链的主要组成成分;1、烟酰胺脱氢酶类;2、黄素脱氢酶类;3、铁硫蛋白类（Fe-S）;已知铁硫蛋白有多种，概括为3类。;铁-硫中心的结构 非血红素铁与硫可以三种方式形成复合物，这些复合物组成了铁-硫中心。;4、辅酶Q类;氧化型辅酶Q10(CoQ);在氧化—还原反应中辅酶Q的结构变化;--CoQ在线粒体内膜中有结合到膜上的，也有游离的，以两种形式存在。异戊二烯侧链使CoQ没有极性，可快速扩散通过线粒体内膜. --CoQ不只接受NADH的电子，也接受琥珀酸脱氢酶，脂酰辅酶A脱氢酶以及其他黄素酶脱下的电子。 琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶类似，也是通过铁-硫中心把与它结合的FADH2的电子传递到CoQ上。它的更完整的名称应该是琥珀酸-CoQ还原酶。 --CoQ下一步要被细胞色素氧化。它可被视为一个集合点把几个黄素蛋白脱氢酶携带的电子集合在一起，传递给细胞色素，最终传递到氧。CoQ在电子传递链中处于中心地位。 CoQ可接收和传递单电子和双电子，因为它可通过一个半醌中间物进行氧化还原。CoQ之后的细胞色素只能接收和传递单电子。CoQ是双电子载体与单电子载体（细胞色素）之间的最适交界点。;5、细胞色素类;(a)血红素与细胞色素c, c1之间形成的共价键。 细胞色素b, c, c1都含有原卟啉与铁形成的复合物，即血红蛋白和肌球蛋白中的血红素。 在细胞色素c和c1中，血红素通过两个乙烯侧链和两个半胱氨酸残基之间形成的硫脂键与蛋白共价相连。;（三）呼吸链中传递体的排列顺序;;3、呼吸链中传递体的排列顺序的???据;②利用呼吸链抑制剂测定顺序;;③体外重组呼吸链;;（二）ATP的生成 ;1、底物水平磷酸化;;2、电子传递体系磷酸化; （1）P／O比值是指每消耗一摩尔氧原子所消耗无机磷酸的摩尔数。根据所消耗的无机磷酸摩尔数，可间接测出ATP生成量。实验指明:;氧化磷酸化“偶联位点”的实验测定;①因为琥珀酸氧化脱下的氢经过FADH2传递给辅酶Q，再通过传递链到氧，其P/O比为2，表明在辅酶Q之前有一个偶联位点。这可用实验验证。 用抗霉素A使通过细胞色素的电子传递阻断。加入铁氰化物作为人工电子受体，电子可以继续流动。在这些条件下，NAD+连接的底物，如β-羟基丁酸，氧化得到的P/O比是1，证实在细胞色素b之前有一个偶联位点。;②抗坏血酸是一个人工的电子供体。在另一个电子受体四甲基苯二胺的存在下，电子可在细胞色素C的位点进入呼吸链，使细胞色素C还原。还原的细胞色素C通过细胞色素氧化酶氧化的P/O比是1。证实在细胞色素C的右侧有一个偶联位点。 ③把纯化的细胞色素C加入线粒体可从电子传递链中把电子取出。进一步加入一个细胞色素氧化酶抑制剂，如氰化物，可使电子被迫离开呼吸链中的细胞色素C。在这些条件下，琥珀酸可被氧化，P/O比值是1。这证实在细胞b和C1之间有一个偶联位点。 ; （2）从△G0′的计算也可推断氧化磷酸化的耦联部位，并与P／O比值的结果一致。每合成1摩尔ATP需能30．52kJ，在NADH呼吸链中3个部位所产生的自由能均超过此值。;3、氧化磷酸化的阻断作用 ;（1）电子传递抑制;（2）氧化磷酸化解偶联;（3）离子载体抑制;（4）氧化磷酸化抑制;4、线粒体外NAD(P)H的氧化磷酸化;;;（2）苹果酸/天冬氨酸穿梭;;（3）植物细胞质NADH的转运 ;（4）异柠檬酸穿梭; ②通过异柠檬酸穿梭作用。通过该穿梭作用，胞质中的NADPH转变为线粒体基质中的NADH，在这种转运过程中电子耗能很少，故每个NADPH可产生3个ATP。;（三）氧化磷酸化作用的机理; 这一假说认为电子传递和ATP生成的偶联是通过一系列连续的化学反应，形成一个高能共价中间物，这个中间物在电子传递中形成，随后又裂解将其能量供给ATP的合成。化学偶联假说在呼吸链中找不到实际例子，但可用来解释3-磷酸甘油醛脱氢酶催化的产能和贮能过程。; 2.构象偶联假说 这种假说认为线粒体内膜的F1ATP酶或某种电子传递蛋白的分子构象会发生变化