细胞工程知识点陈永勤.pdfVIP

第一章 植物组织培养简介 1.细胞工程（ Cell Engineering ）：在体外对生物的细胞进行生长与分化的调控、遗传重组与 改良，使其生产出人类所需要的产品。 2.细胞全能性假说是开展植物组织培养研究的理论基础； 验证细胞全能性假说是开展植物组 织培养研究的动力。 3.细胞分裂素与生长素的浓度比值决定着愈伤组织根或芽的形成。细胞分裂素 /生长素的比 值： 高：形成芽；低：形成根；相当：愈伤组织增殖，但不分化。 4.植物组织培养在植物性状改良上的应用 : ① .胚培养可克服远源杂交不孕的困难； ② .花药（花粉）培养可大大缩短育种年限； ③ .原生质体融合技术可克服有性杂交不亲和，创造远源杂种、甚至新的物种； ④ .单细胞培养技术可用于突变体的筛选。 第二章 植物组织培养的设施 1.培养室所需要的设备： ① .培养架 :培养架的设计既要考虑充分利用培养室的空间，也要考虑取放材料方便。 ② .加温 / 降温设备：空调 ③ .光照和控光设备。分为光培养室和暗培养室。光培养室常用日光灯照明，并安置控制光 照时间的自动开关。 2.瓶盖、瓶塞、或者封口膜的透气性能对材料的培养有显著影响，透气性能不好的，容器中 湿度高（饱和） ，容易导致植物材料出现玻璃化（生理病态，植物材料呈水渍状，深绿色， 刚脆，无继续培养的价值） 第三章 植物组织培养基 1.培养基的重要性 : 1)植物材料生长的营养来源； 2) 调节植物材料生长与分化的主要途径。 2.培养基的组成： ① .水：要求纯净。应用蒸馏水、去离子水，而不用自来水。 ② .无机营养成分： 植物生长发育需要有 16 种必需元素：大量元素： C, H, O, N, P, K, Ca, Mg, S ；微量元素： Fe, Cl, Cu, Mo, B, Zn, Mn 。不同培养基的无机盐（特别是大量元素）的浓度差异很大。 ③ .有机营养： 有机营养（有机成分） ：维生素和氨基酸的总称。 常用：肌醇、烟酸、维生素 B6 、维生素 B1 和甘氨酸等。 其它维生素：维生素 M （叶酸）、维生素 B2 （核黄素）、泛酸钙等。 其它氨基酸：谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺等 ④ .碳源：最常用的糖是蔗糖 (sucrose)，但也有时用葡萄糖 (glucose)、果糖 (fructose) 或其它的 糖 (lactose, maltose)，有时几种糖混用。糖是营养物质，但不是越多越好。培养基中糖的用 量大多在 10— 60g/L ，一般为 20— 30 g/L 。 ⑤ .植物生长物质：植物生长物质是植物激素和植物生长调节剂的总称。 植物激素：植物合成的、微量就有显著生理效应的物质。 植物生长调节剂：人工合成的、具有植物激素相似作用的物质。 ⑥ .凝固剂：在植物组织培养中，琼脂（ agar）是最常用的凝固剂，用量为 6-12g/L 。另外还 有 phytagel, Gelrite, 4g/L 。 ⑦ .有机附加物： 水解酪蛋白、 水解乳蛋白、 蛋白胨、胰蛋白胨、 酵母提取物： 用量为 0.1-10g/L ， 一般为 0.5-3 g/L 。椰子汁： 100-200ml/L 。 ⑧ .其它物质：防止与减缓植物材料褐化的物质： 1）抗氧化剂：抗坏血酸（ Vc ）、 L- 半光氨酸、柠檬酸、二硫苏糖醇等。 2 ）吸附剂：活性炭、聚乙烯吡咯烷酮（ PVP ）。 活性炭吸附无选择性；改善培养效果、促进生根。 PVP 专一吸附酚类物质。 3.植物激素在植物组织培养中的作用： ①生长素： (1) 促进细胞分裂、增殖，导致愈伤组织的形成 (2,4-DNAAIAA, IBA) ； (2) 控 制器官的分化，诱导根的形成。 （IBANAAIAA) ②细胞分裂素 :促进细胞分裂、增殖，导致愈伤组织的形成；控制器官的分化，诱导芽的形 成和增殖。 ③赤霉素 :赤霉素最显著的作用是促进细胞的伸长，也有打破种子休眠的作用。在植物组织 培养中使用赤霉