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细胞计数仪怎么操作
你知道细胞计数仪怎么操作呢 ?很多研究人员都在使用
血球计数器,使用起来不方便,而自动的细胞计数仪使用方
便,时间短,那么你知道细胞计数仪怎么操作吗 ?一起来看
看。
文章目录
一、细胞计数仪怎么操作
二、如何选购细胞计数仪
三、使用细胞计数仪的注意事项
细胞计数仪怎么操作
1、细胞计数仪怎么操作
1.1 、将计数板及盖玻片擦拭干净 , 并将盖玻片盖在计数
板上。
1.2 、轻轻吹打细胞悬液 , 使细胞均匀分布 ; 吸出少许细胞
悬液滴在细胞入口 , 使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间 ,
静置 1-2min, 使细胞沉降 ; 注意盖玻片下不要有气泡 , 也避免
细胞悬液进入旁边的槽中。
1.3 、在显微镜下对 A/B/C/D 四个大格内的细胞进行计数 ,
压在大格四周边线上的细胞只计数压在 2 条边线上的细胞
( 如右侧和下方 ); 若镜下有 2 个细胞组成的细胞团 , 则应按单
个细胞计算 ; 若细胞团数量较多 , 占细胞总量的 10%左右 , 则
说明细胞分散不好会导致计算不准确 , 需要重新制备细胞悬
液。
1.4 、按公式计数细胞数量 : 细胞数 /mL= 四个大格内细胞
总数× 104/4?( 每一个大格的体积为长 1mm×宽 1mm×高
0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此计算时需× 104) 。
2、细胞计数仪的原理
2.1 、电阻抗检测原理血细胞是相对不良导体 , 当血细胞
悬浮电解质中 , 将小孔管插入细胞悬液 , 使其管内充满稀释
液 , 当一个细胞通过小孔时 , 瞬间引起电压变化出现一个脉
冲信号 , 细胞体积越大 , 引起脉冲越大 , 产生脉冲振幅越高。
2.2 、流式细胞术加光学检测原理利用流式细胞术使单个
细胞随着流体动力聚集的鞘流液在通过激光照射的检测区
时, 使光束发生折射、衍射和散射 , 散射光光检测器接受后产
生脉冲 , 脉冲大小与被照细胞的大小成正比 , 脉冲的数量代
表了被照细胞的数量。
3、白细胞分类原理
白细胞三分类原理 : 根据电阻抗法原理 , 不同体积的白细
胞通过小孔时产生的脉冲大小有明显差异 , 仪器根据脉冲的
大小将白细胞进行分群。标本中加入溶血剂 , 将红细胞溶解 ,
仪器将从白细胞计数池中测量得到的大于 35fl 电子脉冲的
数量作为白细胞计数。同时根据脉冲的大小将血内白细胞分
为三群 : 小细胞群 (35 ~90fl, 主要为淋巴细胞 ) 、中间细胞群
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