实验五肝功能和两对半检查.pptVIP

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文档如有侵权,请联系本人协改正删除,内容如有不当之处,请联系本人改正或者删除,谢谢。 文档如有侵权,请联系本人协改正删除,内容如有不当之处,请联系本人改正或者删除,谢谢。 实验五肝功能和两对半检查 要求 掌握血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定原理和临床应用; 掌握两对半测定试验原理和操作方法。 一、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定 一、ALT测定原理 ALT催化ɑ-酮戊二酸与丙氨酸之间氨基转移反应: L-丙氨酸+ ɑ-酮戊二酸 L-谷氨酸+丙酮酸 经一定时间反应后, 加入2,4二硝基苯肼终止反应, 并与溶液中两种ɑ-酮酸生成对应2,4二硝基苯腙, 在碱性条件下呈棕红色。但两种苯腙吸收光谱有差异, 在500-520nm差异最大, 以等摩尔浓度计算, 丙酮酸苯腙吸光度约为ɑ-酮戊二酸苯腙3倍。据此特点, 可计算出丙酮酸生成量, 藉以推算出ALT活力。 ALT 二、操作方法 空白管(ml) 测定管(ml) 血清 0.10 0.10 谷丙基质液 0.50 混匀, 37℃水浴 30分钟 2,4二硝基苯肼液 0.50 0.50 谷丙基质液 0.50 混匀, 37℃水浴 20分钟 0.4N氢氧化钠溶液 5.00 5.00 混匀, 37℃水浴 10分钟 505nm, 对照管调0, 测定测定管吸光度后, 从标准曲线查ALT活力单位。 二、参考值 ALT≤40U 酶活力受温度和孵浴时间及PH等影响 二、两对半测定 文档如有侵权,请联系本人协改正删除,内容如有不当之处,请联系本人改正或者删除,谢谢。 文档如有侵权,请联系本人协改正删除,内容如有不当之处,请联系本人改正或者删除,谢谢。

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