微生物实验室生物安全操作规程.docxVIP

微生物实验室生物安全操作规程 一、 目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫 生以及防止对外界环境造成污染。 二、 适用范围 适用于所有进入微生物实验室人员。实验室工作人员必需严格遵 守安全操作规程。 三、 安全操作规程： 员工安全操作规程 1.1实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全 级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程 序。 1.2禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验 室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可 进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负 责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必 须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4接触微生物或含有微生物的物品后， 脱掉手套后和离开实验室 前要洗手。 1.5禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的 产生。 1.8每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙 醇或巴氏消毒液消毒。 1.9实验人员在配制培养基过程中，需尽量避免接触性或吸入性危 害，特别是配制TTB和碘液等对人体有害的培养基或试剂时，要穿戴 工作服、口罩和手套，并在通风橱中进行。 1.10工作人员应接受必要的免疫接种和检测（如乙型肝炎疫苗、卡 介苗等）。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露 以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感 染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.11禁止将无关动物带入实验室。 无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次（拖布专 用），紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75% 酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物 盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如 5%的甲酚溶液，75%的 酒精，0.1%的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净 度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密， 并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后 在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套 （或用75%乙醇等消 毒剂再次擦拭双手），方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌 30分钟，灭 菌后通无菌风至少30min以上人员才能进入。操作完毕，应及时清理 无菌室，再用紫外灯辐照灭菌30分钟。 2.8供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。 检查前，用75%的酒精棉球消毒外表面。 2.9每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 2.10吸取菌液时，必须用移液器吸取，切勿直接用口接触吸管。 2.11接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后， 方可接种培养物。 2.12带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有 5%来苏 尔溶液或巴氏消毒液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 2.13如有菌液洒在桌上或地上，应立即用 5%石碳酸溶液或3%的 来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液 污染时，应立即脱去，局压蒸汽火菌后洗涤。 2.14凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗， 严禁污染下水道。 2.15无菌室应每月检查菌落数。在层流无菌风开启的状态下，取 内径90mm的无菌营养琼脂平板5个，分别放置无菌室四周及中央位 置，开盖暴露30分钟后，倒置于36C培养箱培养48小时，取出检查。 100级洁净区平板杂菌数平均不得超过 1个菌落/平皿，10000级洁净室 平均不得超过3个菌落/平皿。如超过限度，应用臭氧发生器等对无菌 室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 压力蒸汽灭菌器的安全使用操作程序： 3.1堆放：将需灭菌的物品予以妥善包扎，各包之间留有空隙，依 次堆放在灭菌桶的筛板上，以蒸汽穿透，提高灭菌效果。需灭菌物品 外需黏上高压指不■胶带以检验火菌温度是否达到要求。 3.2加水：在锅体内注入生活用水，水位一定要超过电热管 2厘米 以上（不宜过多）；连续使用时，每次操作前，必须补足上述水位，以 免烧坏电热管和意外发生。 3.3密封：在每次使用高压锅前，都必须认真检查高压锅的出气伐 和安全阀，确保其状态完好，如有故障，在故障排除之前不得使