核酸化学医学知识讲座.ppt

cAMP 三、核苷酸紫外吸收特征 因为嘌呤碱和嘧啶碱含有共轭双键, 所以碱基、核苷、核苷酸、核酸都在240－290nm范围内有特征吸收。组分结构不一样, 紫外吸收也就不一样。如λmax AMP257nm、GMP为256nm、CMP为280nm、UMP为262nm。通常测定对核酸及核苷酸选择260nm波长。 核苷酸在240－290nm紫外波段有一强烈吸收峰,不一样核苷酸有不一样吸收特征, Amax在260nm周围。 利用多种核苷酸紫外吸收标准吸光度比值和摩尔吸收系数（如: ε260）, 能够经过紫外分光光度计对核苷酸样品进行定性或定量测定。 P163 表5-2 表5-3 摩尔吸收系数: 1 摩尔浓度核苷酸溶液在某一波长吸光度 四.核苷酸解离性质 1、碱基解离 嘌呤、嘧啶杂环中氮以及各替换基具 有结合和释放质子能力,所以这些物 质现有碱性解离又有酸性解离性质。 pK1’=4.6 pK2’=12.5 ±H+ ±H+ 2、核苷酸解离 因为磷酸基存在,使核苷酸含有较强酸性。 磷酸基解离对整个核苷酸解离后所带净 电荷量影响显著. 因为核苷酸是两性电解质, 在不一样pH溶液中解离程度不一样, 在一定条件下可形成兼性离子 pH pH 解离度 解离度 核苷酸等电点 pH 尿苷酸碱基碱性极弱, 实际测不出含氮环解离曲线, 故不能形成兼性