专06 实验方法的选择与检测系统的评价验证.ppt

第六章 实验方法的选择与 检测系统的评价验证;教学目的和要求：;;一、实验方法的分级;（一）常规方法（routine method ）;（二）参考方法reference method;应用： 能在条件优越的实验室作常规分析，主要用于鉴定常规方法，评价其误差大小、干扰因素并决定是否可以被接受；用于鉴定二级标准品和为质控血清定值；用于 商品试剂盒的质量评价。;;应用： 由于技术要求太高，费用昂贵，这类方法不直接用于鉴定 常规方法的准确性，只用于评价参考方法与一级标准品。; 项目 ;二、实验方法选择的目的;三、实验方法选择的原则;四、实验方法选择的步骤;第二节 试剂盒的选择;第三节 检测系统性能评价方法; 在相同条件下，对同一样本连续进行n次重复测定结果的符合程度。 在有限次测定情况下，一般用 （总体标准差）的估计值S（样本标准差） 和变异系数CV来表达这种精密度。;批内精密度试验： ;日间精密度试验;　　1.试验条件稳定 2.实验标本应与真实标本有同样基质 3.检测系统应处于良好状态;二、正确度评价;影响因素： 　　　系统误差、随机误差（了解）;;（一）重复性试验;(二)回收试验;回收浓度=分析标本测得浓度 - 基础标本测得浓度　（实际测得值）;注意事项： 吸量准确； 加入标准液后，其实验样品的被子测浓度最好达到医学决定水平； 总浓度必须在方法分析范围内； 需加入高中低不同浓度回收试验，计算平均回收率； 加入标准液的体积一般在10%内； 重复2-3次。;干扰试验;试验的方法:;注意事项 被试验的物质：胆红素、溶血、防腐剂、抗凝剂、药物等 可疑干扰物的浓度：干扰物浓度有可能达到病理标本最高浓度值。 本试验检测的误差包括方法特异度不高和干扰物作用引起的误差。 消除干扰常用方法 空白对照：试剂空白：常见 　　　　　　　标本空白：内空白法和外空白法 物理、化学方法分离干扰物 双波长或多波长法检测排除干扰 误差较大又无法消除，则改进或更换方法。;(四)方法对比试验（熟悉）;①在进行临床化学常规方法的评价时，最好选择参考方法作为比较方法 ②若采用已知偏差法，则有部分误差来自比较方法（与已??偏差 一致的那部分误差），剩余的则属于侯选方法。 ③若采用未知偏差法，分析误差可能来源于二者之一或两者都有，难以分析。;三、可报告范围评价 定义：观察一种检测方法或一个检测系统的检测范围。 检测范围的要求：覆盖宽，至少应该覆盖医学决定水平 （一）实验前准备： 最理想标本：患者的新鲜低值和高值血清标本。多用人工方法制备。 1.试验样本 2.确定浓度范围 （二）样本检测：随机排列，每个样本测3-4次 （三）统计处理:;四、检出限的验证 检出限（LoD）检测系统可检测出分析物的最小值 空白限（LoB）规定的可能条件下，空白样品被观察到的系列检测结果的最大值 验证LoD的程序 1.试验样品：空白样品、检测限样品 2.测定次数：至少20次 3.检测LoB 4.结果判断;;;　 水平１：提示需要进一步检查的阈值 水平２：提示需要治疗措施的界点 水平３：提出预后或要紧急处理的界值;第四节 检测系统性能验证和确认 ;量值溯源的目的;量值溯源的基本原理;参考物的量值溯源等级图;量值溯源的理想情况是可溯源至国际单位制SI，要溯源至国际单位，必须有一级参考测量程序 目前满足上述条件的检验指标有25-30种定义明确的小分子化合物（如某些电解质，代谢产物和底物类、甾体激素、甲状腺激素）;检测不能溯源到SI的情况 有国际约定参考测量程序（非一级参考测量程序）和一种或多种用此参考测量程序定值的国际约定校准物质，如GHb 有一种国际约定参考测量程序,无国际约定校准物质，如高密度脂蛋白胆固醇 一种或多种国际约定校准物质及定值方案，无国际约定参考测量程序，如抗体和肿瘤标记物等300多种指标 既无参考测量程序也无校准的参考物质;临床实验室的溯源;参考系统;参考方法分类;参考物质;溯源性有关文件;溯源性国际机构;JCTLM的两个工作小组;复习题： 一、名词解释： 1、决定性方法 2、参考方法、3、常规方法、4、线性范围 5、检出限 6、生物参考区间 填空题：1、实验方法的分级分为——、——、——。 2、精密度评价的指标——、—— 3、 系统误差分为——、——。 选择题：关于随机误差说法错误的是： A、随机误差用重复性实验验证 B、变异系数可评价随机误差 C、标准差可评价随机误差 D、